Perbedaan Antara RT-PCR dan QPCR

Reaksi rantai transkripsi polimerase terbalik (RT-PCR)

RT-PCR vs QPCR

Kemajuan dalam bioteknologi telah menghasilkan penemuan beberapa cara untuk mengatasi tuntutan transplantasi organ selama bertahun-tahun. Sebelumnya, seseorang yang secara sukarela akan menyumbangkan organ apa pun segera setelah kematian kepada pasien yang membutuhkan hanya bisa memulai operasi untuk transplantasi. Penelitian dan penelitian berkelanjutan oleh para ahli biologi mengarah pada penemuan sel induk.

Sel punca merujuk pada sel yang diambil dari DNA embrio, yang akan berfungsi sebagai sumber regenerasi sel yang pada dasarnya akan menjadi klon organ tempat DNA diambil. Sementara aktivis hak asasi manusia melobi untuk menghentikan prosedur tersebut, operasi yang berhasil memang membuktikan keefektifan perkembangan sel induk dalam transplantasi organ..

Namun, sebelum seseorang dapat menghargai dan memahami sel induk sepenuhnya, ada kebutuhan untuk dibiasakan dengan berbagai terminologi yang terkait dengan penemuan ilmiah ini. Budidaya sel induk berkaitan dengan DNA dan kodenya. Dengan demikian, sangat penting bagi siswa atau individu yang tertarik dalam bidang ini untuk membedakan antara RT-PCR dan qPCR.

Reaksi rantai transkripsi polimerase terbalik (RT-PCR) adalah salah satu dari banyak varian reaksi rantai polimerase, atau PCR. Teknik laboratorium ini banyak digunakan dalam biologi molekuler agar para ilmuwan dapat menghasilkan banyak salinan dari urutan DNA tertentu melalui proses yang diciptakan sebagai "amplifikasi." Perbedaan antara RT-PCR dan PCR tradisional adalah bahwa RNA pertama kali ditranskripsikan secara terbalik ke dalam komplemen DNA-nya, yang menggunakan reverse transcriptase. DNA komplementer baru yang mengandung transkripsi terbalik kemudian akan diamplifikasi menggunakan PCR tradisional atau PCR real-time.

Sebagian besar siswa yang mempelajari proses ini sering membuat kesalahan dengan mengubah PCR transkripsi terbalik dan PCR waktu-nyata karena keduanya disingkat sama. Untuk menghindari kebingungan, ahli biologi memberi label PCR waktu-nyata sebagai PCR waktu-kuantitatif atau qPCR.

QPCR sangat berbeda dari RT-PCR, karena qPCR bertanggung jawab untuk mengukur amplifikasi saat itu terjadi. Dapat dikatakan bahwa RT-PCR memulai proses amplifikasi, sementara qPCR mengukurnya saat prosedur berlangsung.

PCR Real-Time Kuantitatif

QPCR telah benar-benar merevolusi metode pendekatan satu arah tradisional ketika datang untuk mengukur DNA dan RNA, karena menerapkan metode qPCR memungkinkan para ahli biologi untuk menentukan konsentrasi awal asam nukleus bahkan sebelum hasil reaksi telah diamati dan ditulis.

Penerapan qPCR, yang sekarang dianggap sebagai teknik analisis yang paling kuat dan sensitif untuk studi genetika, telah melebar secara signifikan. Saat ini terlibat dalam analisis ekspresi gen kuantitatif, genotyping, deteksi patogen, dan analisis SNP, bersama dengan pengukuran interferensi RNA..

QPCR sering dikombinasikan dengan proses transkripsi terbalik untuk mengukur RNA messenger dan MicroRNA yang ada dalam sel-sel jaringan yang diamati dan diujicobakan. Ini kemudian memberikan perbedaan lain yang terlihat antara keduanya: RT-PCR dapat digunakan untuk proses amplifikasi, tetapi perlu digabungkan dengan qPCR untuk keperluan kuantifikasi.

QPCR juga dikenal lebih kuantitatif karena data dapat dikumpulkan seiring fase pertumbuhan eksponensial (log) PCR berlangsung. Ahli biologi mencatat bahwa jumlah produk sampingan PCR berbanding lurus dengan jumlah asam nukleat templat yang akan diukur melalui qPCR.

Di sisi lain, RT-PCR jauh dari memiliki sifat kuantitatif karena ketaatan intensitas pita yang diamplifikasi pada gel mengikuti standar konsentrasi yang ditetapkan dapat menyebabkan inferensi "semi kuantitatif".

Ringkasan:

1.QPCR dan RT-PCR adalah istilah yang digunakan dalam bioteknologi dan digunakan untuk produksi beberapa salinan DNA.
2.RT-PCR digunakan untuk memperkuat transkripsi kode DNA yang dibalik; QPCR mengukur amplifikasi.
3.RT-PCR adalah untuk amplifikasi, sedangkan qPCR adalah untuk kuantifikasi.
4.QPCR bersifat kuantitatif, sedangkan RT-PCR tidak.