Perbedaan Antara Imunofluoresensi dan Imunohistokimia
Share
Perbedaan Kunci - Imunofluoresensi vs Imunohistokimia
Diagnosis penyakit, yang menggunakan metode biologis molekuler, telah menjadi bidang teknologi laboratorium klinis yang sedang berkembang. Ini mencakup semua tes dan metode untuk mengidentifikasi penyakit dan memahami penyebab penyakit dengan menganalisis DNA, RNA, atau protein yang diekspresikan dalam suatu organisme. Kemajuan pesat dalam diagnostik molekuler telah memungkinkan penelitian dasar tentang penyakit menular dan tidak menular. Ini digunakan untuk menentukan perubahan dalam urutan atau tingkat ekspresi dalam gen atau protein penting yang terlibat dalam penyakit. Immunofluorescence (IF) dan Immunohistochemistry (IHC) adalah dua teknik yang banyak digunakan dalam biologi kanker. IF adalah jenis IHC di mana metode deteksi fluoresensi digunakan untuk menganalisis antibodi monoklonal dan poliklonal, sedangkan IHC menggunakan metode berbasis kimia untuk mendeteksi antibodi monoklonal dan poliklonal. Ini adalah perbedaan utama antara IF dan IHC.
ISI
1. Ikhtisar dan Perbedaan Utama
2. Apa itu Imunofluoresensi
3. Apa itu Imunohistokimia
4. Kesamaan Antara Imunofluoresensi dan Imunohistokimia
5. Perbandingan Berdampingan - Imunofluoresensi vs Imunohistokimia dalam Bentuk Tabular
6. Ringkasan
Apa itu Immunofluorescence (IF)?
Immunofluoresensi adalah teknik deteksi dimana antibodi yang digunakan dalam pengujian diberi label menggunakan pewarna fluoresen atau protein fluoresen untuk tujuan deteksi. Antibodi sekunder berlabel dapat menghasilkan sinyal latar belakang yang tidak diinginkan; Oleh karena itu, teknik JIKA didasarkan pada pelabelan antibodi primer itu sendiri saat ini untuk menghindari sinyal yang tidak diinginkan selama deteksi. Melalui teknik ini, pengikatan non-spesifik antara antibodi primer dan sekunder dicegah, dan lebih cepat karena tidak ada langkah inkubasi sekunder yang terlibat. Kualitas data juga ditingkatkan.
Gambar 01: Pewarnaan imunofluoresensi ganda untuk BrdU, NeuN, dan GFAP
Fluorokrom atau pewarna fluoresen adalah senyawa yang dapat menyerap radiasi, lebih disukai radiasi ultra violet yang bersemangat. Ketika partikel mencapai keadaan dasar dari keadaan tereksitasi, mereka memancarkan radiasi yang ditangkap dan dideteksi oleh detektor untuk membentuk spektrum. Adalah sangat penting bahwa label fluoresen kompatibel dan stabil untuk reaksi khusus dan harus dikonjugasikan dengan tepat pada antibodi untuk mendapatkan hasil yang akurat. Salah satu fluorochromes yang paling banyak digunakan adalah fluorescein isothiocyanate (FITC), yang berwarna hijau, dengan panjang gelombang puncak penyerapan dan emisi masing-masing 490 nm dan 520 nm. Rhodamin, agen lain yang digunakan dalam IF, berwarna merah dan memiliki panjang gelombang puncak serapan dan emisi yang berbeda yaitu 553 nm dan 627 nm.
Apa itu Immunohistokimia (IHC)?
IHC adalah metode pengujian molekuler yang dilakukan untuk mengidentifikasi dan mengkonfirmasi keberadaan antigen dalam sel target. Sel target bisa berupa partikel infeksius, patogen mikroba, atau sel tumor ganas. IHC menggunakan antibodi monoklonal dan poliklonal untuk menentukan keberadaan antigen yang ada pada permukaan sel sel target. Teknik ini didasarkan pada pengikatan antigen-antibodi. Penanda deteksi dikonjugasikan ke antibodi ini untuk mendeteksi ada atau tidak adanya antigen tertentu. Penanda ini dapat berupa penanda kimia seperti enzim, antibodi yang ditandai dengan fluoresensi atau antibodi berlabel radio.
Gambar 02: Irisan otak-tikus yang diwarnai oleh Imunohistokimia
Aplikasi IHC yang paling populer adalah dalam biologi sel kanker untuk mengidentifikasi keberadaan tumor ganas, tetapi juga digunakan untuk mendeteksi penyakit menular..
Apa Persamaan Antara Imunofluoresensi dan Imunohistokimia?
- Imunofluoresensi dan Imunohistokimia terjadi dalam kondisi in vitro.
- Kedua teknik didasarkan pada antigen-antibodi
- Keduanya adalah teknik yang sangat cepat.
- Hasil teknik dapat direproduksi.
- Keduanya telah meningkatkan kualitas data.
- Teknik-teknik ini digunakan dalam diagnosa untuk kanker dan penyakit menular.
Apa Perbedaan Antara Imunofluoresensi dan Imunohistokimia?
Imunofluoresensi vs Imunohistokimia | |
| JIKA adalah teknik deteksi di mana antibodi yang digunakan dalam pengujian diberi label menggunakan pewarna fluoresen atau protein fluoresen untuk deteksi. | IHC adalah teknik deteksi di mana antibodi yang digunakan dalam pengujian diberi label menggunakan bahan kimia atau elemen radioaktif untuk deteksi. |
| Ketepatan | |
| Akurasi lebih tinggi dalam teknik IF dibandingkan dengan IHC. | Akurasi lebih rendah di IHC. |
| Kekhususan | |
| JIKA lebih spesifik. | IHC kurang spesifik. |
Ringkasan - Imunofluoresensi vs Imunohistokimia
Mekanisme molekuler telah membawa banyak perubahan di bidang kedokteran, sehingga memunculkan metode pengujian molekuler canggih yang telah membawa revolusi di bidang diagnostik. Penemuan ini telah mengarah pada identifikasi dan konfirmasi penyakit yang cepat dan akurat, sehingga memungkinkan keberhasilan administrasi dan produksi obat-obatan. Teknik-teknik ini juga digunakan dalam farmakologi untuk menemukan target obat dan untuk mengkonfirmasi sifat farmakokinetik obat selama metabolisme obat. IF dan IHC adalah dua metode diagnostik yang didasarkan pada konsep antigen dan pengikatan antibodi, meskipun cara deteksi pada kedua teknik berbeda. JIKA menggunakan prinsip fluoresensi untuk mendeteksi antigen dan IHC menggunakan konsep konjugasi kimia untuk mendeteksi antigen. Inilah perbedaan antara IF dan IHC.
Unduh Versi PDF dari Immunofluorescence vs Immunohistokimia
Anda dapat mengunduh versi PDF dari artikel ini dan menggunakannya untuk tujuan offline sesuai catatan kutipan. Silakan unduh versi PDF di sini Perbedaan Antara Imunofluoresensi dan Imunohistokimia.
Referensi:
1. Aoki, Valéria, dkk. "Imunofluoresensi langsung dan tidak langsung." Anais Brasileiros de Dermatologia, SociedadeBrasileira de Dermatologia, Tersedia di sini. Diakses 25 Agustus 2017.
2. Duraiyan, Jeyapradha, dkk. "Aplikasi imunohistokimia." Jurnal Ilmu Farmasi & Bioallied, Medknow Publikasi & Media Pvt Ltd, Agustus 2012, Tersedia di sini. Diakses 25 Agustus 2017.
Gambar milik:
1. “Pewarnaan imunofluoresensi ganda untuk BrdU, NeuN dan GFAP” Oleh Ma M, Ma Y, Yi X, Guo R, Zhu W, Fan X, Xu G, Frey WH 2nd, Liu X. - Pengiriman intranasal untuk mentransformasikan faktor pertumbuhan- beta1 pada tikus setelah stroke mengurangi volume infark dan meningkatkan neurogenesis di zona subventrikular; PMID 19077183 (CC BY 2.0) melalui Commons Wikimedia
2. “Hipotalamus jaringan tikus yang diwarnai oleh ABC-Immunohistochemistry” Oleh zabbn - Pekerjaan sendiri (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
