Perbedaan Antara HPLC dan LCMS

Perbedaan Utama - HPLC vs LCMS
 

Mari kita lihat makna HPLC dan LCMS sebelum menganalisis perbedaan antara HPLC dan LCMS. Kromatografi adalah teknik pemisahan dalam analisis kimia di mana konstituen sampel dipisahkan selama perjalanan melalui media kromatografi. Ini juga melibatkan interaksi dengan sampel, fase diam, dan fase gerak. HPLC adalah singkatan dari Kromatografi Cair Kinerja Tinggi, dan digunakan sebagai metode kromatografi cair dalam kimia analitik. Kombinasi dari Kromatografi Cair dan Spektroskopi Massal (LCMS) telah dikembangkan untuk analisis kuantitatif biomolekul terpilih dan memang demikian prosedur pengujian yang sangat sensitif, akurat, dan spesifik dibandingkan dengan HPLC. Ini adalah perbedaan utama antara HPLC dan LCMC. Artikel ini akan memperkenalkan Anda pada HPLC dan LCMC yang berhubungan dengan analisis kimia dan membahas perbedaan antara HPLC dan LCMS.

Apa itu HPLC??

Kromatografi cair kinerja tinggi (HPLC) adalah yang populer teknik pemisahan dalam kimia analitik. Itu terutama digunakan untuk memisahkan komponen, untuk mengidentifikasi dan mengukur setiap komponen dalam suatu campuran. Sebelumnya, metode ini dikenal sebagai kromatografi cair tekanan tinggi karena tergantung pada pompa untuk mengalirkan pelarut cair bertekanan yang terdiri dari campuran sampel melalui kolom yang dikemas dengan bahan adsorben padat. Masing-masing dan setiap konstituen dalam campuran sampel berinteraksi secara berbeda dengan bahan adsorben padat, yang menghasilkan laju aliran berbeda untuk konstituen yang berbeda. Hal ini dapat menyebabkan pemisahan konstituen karena mereka mengalir keluar kolom HPLC.

HPLC telah digunakan untuk berbagai hal aplikasi seperti analisis kadar vitamin D dalam darah, penggunaan obat terlarang dari atlet dengan mendeteksi residu obat dalam urin mereka, memilah konstituen dari sampel biologis yang kompleks untuk tujuan penelitian dan analisis dan pembuatan obat-obatan.

Apa itu LCMS??

Liquid chromatography-mass spectrometry (LCMS) adalah teknik analitik yang menggabungkan kemampuan pemisahan fisik kromatografi cair dengan kemampuan analisis massa spektrometri massa (MS). Kromatografi cair adalah teknik pemisahan, dan spektrometri massa digunakan untuk menganalisis rasio massa terhadap muatan partikel bermuatan. Pemisahan fisik biasanya dicapai oleh HPLC dan sebagai alternatif, LCMS juga dikenal sebagai HPLC-MS. LCMS adalah a teknik analisis dominan yang memiliki akurasi, sensitivitas, dan spesifisitas sangat tinggi dibandingkan dengan HPLC. Dengan demikian, ini berguna dalam banyak aplikasi seperti tujuan penelitian, analisis obat, analisis makanan, dll. Terutama LCMS digunakan untuk memisahkan, untuk mendeteksi, mengidentifikasi dan mengukur sifat biokimia dari sampel tertentu dengan adanya campuran kimia yang kompleks.

Apa perbedaan antara HPLC dan LCMC?

Akronim dan definisi HPLC dan LCMC

HPLC: HPLC singkatan dari Kromatografi Cair Kinerja Tinggi. Ini adalah teknik pemisahan yang terutama digunakan untuk memisahkan komponen, untuk mengidentifikasi dan mengukur setiap komponen dalam campuran.

LCMS: LCMS adalah singkatan dariKromatografi Cair dan Spektrometri Massa. Ini adalah teknik analitik yang menggabungkan kemampuan pemisahan fisik kromatografi cair dengan kemampuan analisis massa spektrometri massa (MS).

Karakter dari HPLC dan LCMC

Klasifikasi

HPLC: Ini hanya metode Kromatografi Cair.

LCMS: Ini adalah kombinasi dari metode Kromatografi Cair dan metode Spektrometri Massa.

Efisiensi

HPLC: Dibandingkan dengan LCMS, analisis HPLC kurang efisien dan lebih lambat.

LCMS: Dibandingkan dengan HPLC, analisis LCMS lebih efisien dan lebih cepat.

Kepekaan

HPLC: Dibandingkan dengan LCMS, analisis HPLC kurang sensitif.

LCMS: Dibandingkan dengan HPLC, analisis LCMS lebih sensitif.

Kekhususan

HPLC: Dibandingkan dengan LCMS, analisis HPLC kurang spesifik.

LCMS: Dibandingkan dengan HPLC, analisis LCMS lebih spesifik.

Ketepatan

HPLC: HPLC memberikan hasil yang kurang akurat dibandingkan LCMS untuk penentuan beberapa bahan kimia.

LCMS: LCMS memberikan hasil yang lebih akurat daripada HPLC untuk penentuan beberapa bahan kimia.

Komponen

HPLC: HPLC dapat dianggap sebagai komponen LCMS.

LCMS: LCMS tidak dapat dianggap sebagai komponen HPLC.

Sumber Ion

HPLC: Sumber ion tidak ada dalam instrumen HPLC.

LCMS: Sumber ion hadir dalam instrumen LCMS.

Aplikasi

HPLC: Ion, polimer, molekul organik, dan biomolekul dapat dianalisis menggunakan HPLC.

LCMS: Molekul dan biomolekul organik dapat dianalisis. Berbeda dengan HPLC, LCMS dapat digunakan untuk memeriksa campuran yang tidak terselesaikan dengan sempurna.

Operasi

HPLC: Diagram instrumen HPLC diberikan pada Gambar 1, dan biasanya termasuk autosampler, pompa, dan detektor. Sampler memasukkan campuran sampel ke dalam fase gerak (campuran pelarut bertekanan seperti air, asetonitril, dan / atau metanol) yang memindahkannya ke kolom. Pompa memberikan aliran dan komposisi fase gerak yang diinginkan melalui kolom. Kolom diisi dengan adsorben, yang merupakan partikel padat kasar seperti silika atau polimer. Detektor menghasilkan sinyal yang proporsional dengan jumlah kehadiran konstituen sampel dalam kolom, oleh karena itu memungkinkan untuk analisis kuantitatif konstituen sampel yang dipilih. Instrumen HPLC dikendalikan, dan analisis data disediakan oleh mikroprosesor digital dan perangkat lunak pengguna.

Gambar 1: Diagram instrumen HPLC

LCMS: Diagram instrumen LCMS diberikan pada gambar 2. Ekstrak sampel dimasukkan ke dalam kolom yang terdiri dari HPLC. Kolom ini mempertahankan metabolit sampel berdasarkan karakter fisik, dan metabolit yang berbeda mengalir ke spektrometer massa pada interval waktu yang berbeda. Spektroskopi massa digunakan untuk menilai massa partikel, untuk menentukan susunan unsur suatu molekul, dan untuk memperjelas struktur molekul. Namun, sampel harus diionisasi untuk menghasilkan molekul bermuatan untuk menentukan rasio massa terhadap muatan. Karena itu, alih-alih instrumen HPLC, LCMS terdiri dari tiga modul tambahan seperti sumber besi, penganalisa massa, dan detektor. Sumber ion dapat mengubah sampel fase gas menjadi ion dan penganalisa massa mengelompokkan ion berdasarkan massa menggunakan medan elektromagnetik. Akhirnya, detektor mengukur nilai-nilai dan mengirimkan data setiap ion yang ada dalam sampel. Teknik LCMS dapat digunakan untuk aplikasi kualitatif dan kuantitatif.

  Gambar 2: Diagram instrumen LCMS

Kesimpulannya, HPLC adalah metode kromatografi cair sedangkan LCMS adalah kombinasi kromatografi cair dan spektrometri massa. Kedua teknik analisis ini memiliki karakteristik yang berbeda, tetapi mereka dapat digunakan untuk mengidentifikasi dan mengukur komposisi makanan, farmasi, dan molekul bioaktif lainnya..

Referensi Arpino, P. (1992). Spektrometri massa kromatografi cair kombinasi. Bagian III. Aplikasi thermospray. Ulasan Spektrometri Massa, 11: 3. Gerber, F., Krummen, M., Potgeter, H., Roth, A., Siffrin, C. dan Spoendlin, C. (2004). Aspek praktis dari kromatografi cair kinerja tinggi fase cepat terbalik menggunakan kolom 3μm dikemas dan kolom monolitik dalam pengembangan dan produksi farmasi bekerja di bawah praktik manufaktur yang baik saat ini. Jurnal Kromatografi, 1036 (2): 127-133. Lee, M. S. dan Kerns, E. H. (1999). Aplikasi LC / MS dalam pengembangan obat. Ulasan Spektrometri Massa, 18 (3-4): 187-279. Murray, K. K. (1997). Menggabungkan desorpsi / ionisasi laser berbantuan matriks untuk pemisahan cairan. Ulasan Spektrometri Massa 16 (5): 283. Gambar milik: “Hplc” oleh Pengunggah asli adalah Kjaergaard di en.wikipedia - Ditransfer dari en.wikipedia. (Domain Publik) melalui Commons