Perbedaan Antara HPLC dan HPTLC

Perbedaan Utama - HPLC vs HPTLC
 

Perbedaan utama antara HPLC dan HPTLC adalah itu HPLC memungkinkan pemisahan kuantitatif komponen dalam sampel sedangkan HPTLC tidak memungkinkan pemisahan kuantitatif komponen dalam sampel.

Kromatografi adalah metode pemisahan fisik yang digunakan untuk memisahkan dan mengidentifikasi komponen-komponen dalam suatu campuran. Baik HPLC maupun HPTLC adalah teknik kromatografi. HPLC adalah kromatografi cair kinerja tinggi. HPTLC adalah kromatografi lapis tipis kinerja tinggi.

ISI

1. Ikhtisar dan Perbedaan Utama
2. Apa itu HPLC
3. Apa itu HPTLC
4. Perbandingan Berdampingan - HPLC vs HPTLC dalam Bentuk Tabular
5. Ringkasan

Apa itu HPLC??

HPLC adalah kromatografi cair kinerja tinggi. Ini adalah teknik analisis yang digunakan untuk memisahkan, mengidentifikasi, dan mengukur komponen dalam suatu campuran. Dalam teknik ini, sampel dilarutkan dalam pelarut yang sesuai. Kemudian pelarut dengan sampel dilewatkan melalui pompa dengan tekanan yang diberikan. Pompa diisi dengan bahan adsorben padat. Kemudian beberapa komponen mengikat kuat ke bahan penyerap sedangkan komponen lainnya mengikat dengan longgar. Ini menyebabkan komponen memiliki laju aliran yang berbeda melalui pompa. Oleh karena itu, komponen dapat dipisahkan dengan mudah.

Gambar 01: Sistem HPLC

Bahan adsorben yang mengisi pompa dikenal sebagai fase diam. Pelarut dengan sampel terlarut dikenal sebagai fase gerak. Pompa yang digunakan dalam teknik ini disebut kolom. Kolom diisi dengan bahan adsorben, paling umum, partikel silika. Ukuran partikel-partikel ini dapat berkisar 2-50 μm. Proses pemisahan dipengaruhi oleh komposisi fase gerak dan suhu sistem. Interaksi antara fase diam dan komponen dalam sampel dapat berupa interaksi hidrofobik, interaksi dipol-dipol, ikatan ionik, dll..

Tekanan operasi HPLC jauh lebih tinggi daripada kromatografi cair tradisional. Itu terletak sekitar 50-350 bar. Perbedaan antara kromatografi cair dan HPLC adalah bahwa dalam kromatografi cair, sampel jatuh melalui kolom di bawah gravitasi sedangkan, dalam HPLC, sampel ditekan melalui kolom. Ukuran kolom dan partikel penyerap juga sangat kecil jika dibandingkan dengan kromatografi cair tradisional. Namun, resolusi yang diberikan oleh teknik HPLC lebih unggul.

Apa itu HPTLC?

HPTLC adalah kromatografi lapis tipis kinerja tinggi. Ini adalah bentuk TLC tradisional yang canggih dan otomatis. Teknik ini memberikan resolusi yang efisien dalam periode waktu yang singkat. Dalam metode analisis ini, sampel dan referensi dapat dianalisis secara bersamaan, yang memungkinkan sampel untuk dibandingkan dengan referensi. Ini memberikan akurasi analitik yang lebih baik daripada teknik kromatografi lainnya. Waktu yang dibutuhkan untuk analisis lebih sedikit. Teknik ini adalah teknik berbiaya rendah.

Gambar 02: Analisis Pewarna Makanan menggunakan HPTLC

Metode HPTLC adalah proses yang sederhana, dan langkah persiapan sampel juga dihilangkan (Dalam TLC tradisional, langkah persiapan sampel dimasukkan sebelum pemisahan. Langkah ini melibatkan pembersihan dan pengayaan). Pelarut dapat digunakan secara langsung tanpa pra-perawatan meskipun teknik kromatografi lainnya memerlukan pra-perawatan seperti degassing, filtrasi, dll..

Bahan adsorben yang digunakan dalam HPTLC adalah silika dengan ukuran partikel yang sangat kecil. Dalam TLC tradisional, ukuran partikel silika adalah 5-20 μm sedangkan, dalam HPTLC, itu adalah 4-8 μm. Sampel diterapkan ke pelat HPTLC menggunakan aplikator. Ini memberikan aplikasi yang seragam dan aman. Kemudian pelat ditempatkan di ruang yang memiliki fase gerak. Ruang harus jenuh dengan uap fase gerak. Setelah proses HPTLC, bintik-bintik yang bergerak dapat dideteksi. Saat mendeteksi bintik-bintik di piring, teknik HPTLC menggunakan wilayah UV yang cocok atau ruang yodium.

Apa Perbedaan Antara HPLC dan HPTLC?

HPLC vs HPTLC
HPLC adalah kromatografi cair kinerja tinggi.	HPTLC adalah kromatografi lapis tipis kinerja tinggi.
Teknik
Dalam HPLC, fase gerak dengan pelarut dilewatkan melalui kolom yang diisi dengan fase diam.	Dalam HPTLC, sampel terlihat pada pelat TLC dan ditempatkan di dalam ruang yang mengandung fase gerak; kemudian sampel dibiarkan bermigrasi ke atas piring bersama dengan fase seluler.
Pengukuran
Dalam HPLC, perbedaan antara laju aliran komponen melalui kolom digunakan untuk memisahkan komponen dalam sampel.	Dalam HPTLC, perbedaan antara jarak yang ditempuh oleh masing-masing komponen dalam sampel digunakan untuk memisahkan komponen dalam sampel.
Pemisahan Kuantitatif
HPLC memungkinkan pemisahan komponen secara kuantitatif dalam sampel.	HPTLC tidak memungkinkan pemisahan kuantitatif komponen dalam sampel.

Ringkasan - HPLC vs HPTLC

HPLC dan HPTLC adalah dua teknik kromatografi. Perbedaan utama antara HPLC dan HPTLC adalah bahwa HPLC memungkinkan pemisahan komponen secara kuantitatif dalam sampel sedangkan HPTLC tidak memungkinkan pemisahan komponen secara kuantitatif dalam sampel..

Referensi:

1. "Kromatografi Cair Kinerja Tinggi." Wikipedia, Wikimedia Foundation, 10 April 2018, Tersedia di sini.
2. "HPTLC." LinkedIn SlideShare, 30 Mei 2011, Tersedia di sini.

Gambar milik:

1. "HPTLCplatetoMS" Oleh Kjaergaard di Wikipedia bahasa Inggris - Ditransfer dari en.wikipedia ke Commons (Public Domain) melalui Commons Wikimedia
2. "Hplc" Oleh PD Dr. rer. nat. habil. Gertrud Morlock, Profesor Berkaitan (Privatdozentin), Universitas Hohenheim, Institut Kimia Makanan - G. Morlock, C. Oellig, CAMAG Layanan Bibliografi 103 (2009) via Commons Wikimedia