Elektroforesis vs Elektroosmosis
Metode pemisahan fisik seperti penyaringan, distilasi, kromatografi kolom bukanlah metode yang mudah ketika datang ke pemisahan beberapa molekul. Elektroforesis dan elektro-osmosis adalah dua teknik pemisahan lainnya yang dapat digunakan untuk memisahkan partikel bermuatan.
Apa itu Elektroforesis??
Elektroforesis adalah teknik pemisahan molekul berdasarkan ukurannya. Yang mendasar untuk pemisahan ini adalah muatan molekul dan kemampuannya untuk bergerak dalam medan listrik. Ini adalah teknik paling umum dan utama dalam biologi molekuler untuk memisahkan molekul, terutama DNA dan protein. Ini sebagian besar digunakan karena relatif mudah dan murah. Aparat untuk elektroforesis bisa agak rumit, dan persiapannya membutuhkan waktu. Tetapi kita dapat dengan mudah membuat alat elektroforesis dari hal-hal yang kita miliki di laboratorium. Teknik elektroforesis dapat bervariasi tergantung pada tujuan kita. Kita dapat menggunakan elektroforesis satu dimensi untuk pemisahan DNA atau protein. Elektroforesis dua dimensi digunakan ketika sampel yang lebih terselesaikan diperlukan (seperti dalam kasus sidik jari). Gel digunakan sebagai media pendukung untuk memisahkan molekul. Gel ini bisa disiapkan sebagai lembaran datar atau dalam tabung. Dasar dari prosedur ini adalah memisahkan molekul tergantung pada laju pergerakannya melalui gel ketika medan listrik disuplai. Molekul bermuatan negatif seperti DNA cenderung bergerak menuju kutub positif di medan listrik ini sementara molekul bermuatan positif cenderung melakukan perjalanan ke kutub negatif. Dua jenis gel digunakan dalam elektroforesis sebagai agarosa dan poliakrilamida. Keduanya memiliki kekuatan menyelesaikan yang berbeda. Gel bertindak sebagai saringan untuk menyaring berbagai ukuran molekul. Muatan elektrostatik yang diatur dalam gel berperan sebagai gaya.
Pemisahan tergantung pada mobilitas ion.
F = fv = ZeE
V = ZeE / f
F = gaya yang bekerja pada suatu partikel
f = koefisien gesek
V = kecepatan migrasi rata-rata
Z = muatan partikel bermigrasi
e = muatan dasar
E = kekuatan medan listrik
Kondisi yang diperlukan untuk elektroforesis relatif sederhana. Saat membuat gel dan menjalankan sampel, buffer digunakan. Marker dan pewarna digunakan untuk tujuan visualisasi.
Apa itu Electro-osmosis??
Ini adalah proses memindahkan cairan melalui material menggunakan medan listrik terapan. Gerakannya bisa melalui bahan berpori, sepanjang kapiler, membran dll. Ini dapat digunakan sebagai teknik pemisahan (terutama elektro-osmosis kapiler). Kecepatan cairan sebanding secara linear dengan medan listrik yang diterapkan. Itu juga tergantung pada bahan yang digunakan untuk membangun saluran dan solusi yang digunakan. Dalam antarmuka, solusi dan material telah mendapatkan muatan yang berlawanan dan, ini dikenal sebagai lapisan ganda listrik. Ketika medan listrik diterapkan pada solusi, lapisan ganda listrik bergerak oleh gaya Coulomb yang dihasilkan. Ini dikenal sebagai aliran elektro-osmotik.
Apa perbedaan antara Elektroforesis dan Elektro-osmosis? • Dalam elektroforesis, partikel padat (makromolekul seperti asam nukleat atau protein) digerakkan menggunakan medan listrik. Tetapi dalam elektro-osmosis suatu cairan bergerak. • Dalam elektroforesis, bahan padat pendukung adalah gel. Tapi elektro-osmosis itu bisa berupa gel, membran, kapiler, dll. |