Perbedaan Antara ELISA Kompetitif dan Nonkompetitif

Itu perbedaan utama antara ELISA kompetitif dan nonkompetitif adalah itu ELISA kompetitif menggunakan antigen inhibisi sedangkan ELISA non kompetitif tidak menggunakan antigen inhibisi untuk pengujian.

Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) adalah uji imunologis yang mendeteksi berbagai target seperti antibodi, antigen, protein, dan glikoprotein. Ini adalah metode yang cepat dan sederhana untuk dilakukan. Oleh karena itu, lebih sering digunakan untuk tujuan penelitian dan diagnostik. ELISA melibatkan penggunaan enzim dan pengikatan spesifik antibodi dan antigen. Berdasarkan bagaimana reaksi terjadi, ada empat jenis ELISA: ELISA langsung, ELISA tidak langsung, ELISA sandwich, dan ELISA inhibisi. ELISA langsung, tidak langsung dan sandwich adalah jenis ELISA nonkompetitif sementara ELISA inhibisi adalah jenis ELISA kompletif. Tujuan utama dari artikel ini adalah untuk membahas perbedaan antara ELISA kompetitif dan tidak kompetitif.

ISI

1. Ikhtisar dan Perbedaan Utama
2. Apa itu ELISA Kompetitif
3. Apa itu ELISA Nonkompetitif
4. Kesamaan Antara ELISA Kompetitif dan Nonkompetitif
5. Perbandingan Berdampingan - ELISA Kompetitif vs Nonkompetitif dalam Bentuk Tabular
6. Ringkasan

Apa itu ELISA Kompetitif??

ELISA kompetitif mengukur konsentrasi antigen dalam sampel melalui deteksi gangguan sinyal. Di sini, pengujian menggunakan antigen inhibitor. Oleh karena itu, ini adalah jenis penghambatan ELISA. Selama prosedur ini, antigen yang hadir dalam sampel bersaing dengan antigen referensi yang dipilih untuk mengikat sejumlah tertentu dari antibodi berlabel. Selanjutnya, prosedur ini dimulai dengan inkubasi sampel, dengan jumlah berlebih dari antibodi berlabel. Juga, antigen referensi harus dilapisi sebelumnya pada pelat uji sumur berganda. Kemudian campuran sampel harus ditambahkan ke pelat uji yang berisi antigen referensi. Antibodi gratis akan berikatan dengan antigen referensi tergantung pada jumlah antigen dalam sampel. Oleh karena itu, jika lebih banyak sampel antigen hadir, lebih sedikit antigen referensi akan terdeteksi. Dengan demikian, itu menciptakan sinyal yang lebih lemah.

Gambar 01: ELISA

Sebaliknya, ketika sampel mengandung jumlah antigen yang lebih sedikit, semakin banyak antigen referensi akan menempati antibodi dan memberikan sinyal yang kuat. Karena ELISA kompetitif memberikan sinyal yang lebih kuat ketika sampel mengandung jumlah antigen yang rendah, ELISA kompetitif adalah uji yang sangat sensitif, bahkan untuk sampel dengan sejumlah kecil antigen.

Dalam beberapa kit ELISA kompetitif, antigen berlabel digunakan sebagai pengganti antibodi berlabel. Di sini, antigen berlabel dan antigen sampel akan bersaing untuk mengikat pada antibodi primer. Demikian pula, ketika jumlah antigen dalam sampel rendah, jumlah antigen berlabel yang mengikat antibodi akan lebih tinggi dan menciptakan sinyal yang lebih kuat.

Apa itu ELISA Nonkompetitif?

Di antara empat jenis ELISA, tiga jenis adalah ELISA nonkompetitif. Mereka adalah ELISA langsung, ELISA tidak langsung, dan sandwich ELISA. Ketiga format bekerja di bawah prinsip umum ELISA dengan sedikit perbedaan dalam metodologi mereka.

ELISA langsung menggunakan antibodi primer berlabel enzim. Oleh karena itu, tidak memerlukan antibodi sekunder. Oleh karena itu, ELISA langsung lebih cepat daripada jenis ELISA lainnya. Antibodi primer akan langsung berikatan dengan antigen target amobil yang ada di piring. Karenanya, reaksi enzim-substrat akan berlangsung, menghasilkan sinyal yang terlihat.

Gambar 02: Sandwich ELISA

Tidak seperti ELISA langsung, ELISA tidak langsung menggunakan antibodi primer yang tidak berlabel dan enzim yang diberi label antibodi sekunder. Setelah antibodi primer berikatan dengan antigen yang diimobilisasi, antibodi sekunder berikatan dengan antibodi primer. Enzim dalam antibodi sekunder akan bereaksi dengan antigen dan menghasilkan sinyal yang terlihat. Sandwich ELISA berbeda dengan ELISA langsung dan tidak langsung. Di sini, antibodi diimobilisasi ke dinding pelat uji.

Apa Persamaan Antara ELISA Kompetitif dan Nonkompetitif?

• ELISA kompetitif dan nonkompetitif adalah dua jenis teknik uji imunosorben.
• Mereka adalah teknik yang sangat fleksibel dan sensitif.
• Lebih lanjut, ELISA kompetitif dan non kompetitif adalah immunoassay terkait-enzim.
• Juga, kedua metode menghasilkan sinyal karena reaksi enzim-substrat.

Apa Perbedaan Antara ELISA Kompetitif dan Nonkompetitif?

ELISA kompetitif adalah jenis ELISA yang bergantung pada penyelesaian antara antigen analit dan antigen berlabel untuk sejumlah terbatas antibodi spesifik. Di sisi lain, tidak ada persaingan seperti itu antara antigen yang menarik dan antigen referensi dalam ELISA nonkompetitif. Dengan demikian, ini adalah perbedaan utama antara ELISA kompetitif dan nonkompetitif. Demikian pula, ELISA kompetitif adalah penghambatan ELISA sedangkan ELISA nonkompetitif bukanlah ELISA penghambatan. Jadi, ini juga merupakan perbedaan antara ELISA kompetitif dan nonkompetitif.

Selain itu, ELISA kompetitif lebih cocok untuk mengukur jumlah antigen yang rendah. Ini adalah metode sensitif. Di sisi lain, ELISA nonkompetitif tidak tergantung pada jumlah antigen yang ada dalam sampel. Oleh karena itu, ini juga merupakan perbedaan antara ELISA kompetitif dan nonkompetitif.

Infografis di bawah ini menjelaskan perbedaan antara ELISA kompetitif dan non-kompetitif secara komparatif.

Ringkasan - ELISA Kompetitif vs Nonkompetitif

ELISA kompetitif dan nonkompetitif adalah dua jenis utama ELISA atau tes imunosorben terkait-enzim. Dalam meringkas perbedaan antara ELISA kompetitif dan nonkompetitif, ELISA kompetitif bergantung pada persaingan antara antigen yang menarik dan antigen referensi terhadap jumlah antibodi yang terbatas. Oleh karena itu, ELISA kompetitif juga disebut sebagai ELISA inhibisi. Di sisi lain, ELISA nonkompetitif tidak bergantung pada persaingan antara antigen target dan antigen referensi. Menggunakan kelebihan antibodi spesifik berlabel terhadap analit yang menarik. Dengan demikian, ini adalah perbedaan utama antara ELISA kompetitif dan nonkompetitif. ELISA langsung, ELISA tidak langsung, dan sandwich ELISA adalah tiga jenis utama ELISA nonkompetitif.

Referensi:

1. Bio-Rad. “Jenis-jenis ELISA | Bio-Rad. " Bio, Tersedia di sini.
2. "Empat Jenis ELISA." Cusabio Life Science - Mitra Biologi Anda, Tersedia di sini.

Gambar milik:

“Elisa tipus” Oleh Carolfv333 - Pekerjaan sendiri (CC BY-SA 4.0) Commons Wikimedia.
“Sandwich Immunoassay, ELISA” Oleh NickCT - Pekerjaan sendiri (CC BY-SA 3.0) melalui Commons Wikimedia