Perbedaan Antara Transfeksi Transien dan Stabil

Perbedaan Kunci - Transfeksi Transien vs Stabil
 

Transfeksi adalah proses yang terlibat dalam transfer gen sel eukariotik menggunakan metode kimia atau fisik. Transfeksi dapat diklasifikasikan menjadi dua jenis utama yaitu transient transfection dan stable transfection. Selama transfeksi sementara, gen yang menarik gagal untuk berintegrasi dengan genom inang dan diekspresikan sementara di dalam inang untuk jangka pendek sedangkan, dalam transfeksi yang stabil, gen yang diminati berintegrasi dengan genom inang dan dipertahankan untuk jangka panjang dalam beberapa generasi.s. Inilah perbedaan utama antara transfeksi sementara dan stabil. Dalam kedua kasus, transfeksi berhasil, dan gen diekspresikan.

ISI
1. Ikhtisar dan Perbedaan Utama
2. Apa itu Transfeksi Sementara
3. Apa itu Transfeksi Stabil
4. Perbandingan Berdampingan - Transfeksi Transien vs Stabil
5. Ringkasan

Apa itu Transfeksi Sementara?

Transfeksi adalah alat penting untuk memasukkan gen ke dalam sel eukariotik. Di antara dua jenis transfeksi, transfeksi sementara adalah cara umum dalam transfer gen. Melalui vektor, gen asing ditransformasikan di dalam sel inang. Setelah DNA asing memasuki sel inang, ia memiliki dua opsi. Ia dapat berintegrasi dengan genom inang dan mereplikasi, atau tetap berada di dalam tanpa berintegrasi ke dalam genom. Transfeksi transien menunjukkan ekspresi sementara dari gen yang dimasukkan tanpa berintegrasi ke dalam genom inang. Gen mengekspresikan dan menghasilkan protein kode sampai sel membelah. Namun, karena ketidakmampuan integrasi, ia tidak dapat mereplikasi dan masuk ke generasi masa depan. Jenis transfeksi ini berhasil untuk periode waktu yang singkat. Selama pembelahan sel atau karena beberapa faktor lain, DNA asing mengalami degradasi. Transfeksi sementara ditunjukkan ketika DNA asing dalam bentuk DNA yang sangat melingkar.

Gambar 01: Transfeksi Sementara

Apa itu Transfeksi Stabil?

Transfeksi yang stabil menunjukkan integrasi gen asing yang berhasil ke dalam genom inang. Begitu DNA asing masuk ke dalam sel inang, bagian dari DNA asing berintegrasi dengan genom inang dan menjadi bagian darinya. Karenanya, DNA asing juga bereplikasi dan berpindah ke generasi mendatang ketika genom inang bereplikasi. Jenis transfeksi ini rumit dan jarang. Namun, karena transfeksi stabil ke dalam genom, sifat ini dipertahankan untuk periode yang lebih lama dari beberapa generasi.

Transfeksi yang stabil adalah proses yang sulit dan membutuhkan pengiriman DNA dan akuisisi sel dari DNA asing ke dalam genomnya. Oleh karena itu, DNA linier lebih menyukai transfeksi yang stabil daripada DNA sirkular. Namun, tingkat transfeksi yang stabil adalah sekitar satu dari 10⁴ sel yang diubah. Transfeksi yang stabil dapat diamati dengan cotransfomasi dari penanda yang dapat dipilih dan melakukan seleksi buatan pada suatu media.

Gambar 02: Transfeksi Stabil

Apa perbedaan antara Transfeksi Transien dan Stabil?

Transfeksi Transien vs Stabil
DNA asing tidak berintegrasi ke dalam genom inang.	DNA asing berintegrasi dengan genom inang dan menjadi bagian darinya.
Replikasi di dalam Host
Gen yang ditransfusikan secara transien tidak mereplikasi di dalam inang. Karena itu gen tidak diturunkan ke generasi berikutnya.	Gen direplikasi di dalam inang dan diteruskan ke generasi mendatang.
Durasi waktu Ekspresi Gen
Gen diekspresikan untuk periode waktu yang terbatas dan setelah itu, mereka dihancurkan.	Gen menjadi bagian dari genom dan diekspresikan dalam generasi untuk periode waktu yang lama.
Menggunakan
Ini berguna untuk mempelajari efek ekspresi gen jangka pendek atau produk gen.	Ini berguna untuk mempelajari efek ekspresi gen jangka panjang.
Deteksi Transfeksi
Gen diekspresikan dan dapat dengan mudah dideteksi dengan memasukkan gen reporter.	Transeksi yang stabil dapat dengan mudah dideteksi dengan memasukkan penanda yang dapat dipilih dan memilih melalui seleksi buatan pada media.
Kejadian dan Proses
Transfeksi sementara adalah umum dan tidak rumit untuk dilakukan.	Transeksi stabil jarang terjadi dan rumit untuk dilakukan.
Sifat DNA
DNA yang sangat superkoil cocok untuk transfeksi sementara.	DNA linier cocok untuk transfeksi yang stabil.
Aplikasi
Ini digunakan untuk studi gen knockdown atau pembungkaman dengan RNA penghambatan, produksi protein dalam skala kecil	Ini digunakan untuk produksi protein pada skala besar, studi farmakologi jangka panjang, terapi gen, penelitian tentang mekanisme regulasi genetik jangka panjang

Ringkasan - Transfeksi Sementara vs Stabil

Transeksi transien dan stabil adalah dua jenis transeksi yang ditunjukkan selama transfer gen ke sel eukariotik oleh sistem berbasis non-virus. DNA asing yang ditransformasi tidak terintegrasi dengan genom inang dalam transfeksi sementara sementara itu terintegrasi dengan genom inang dalam transfeksi yang stabil. DNA melingkar melingkar ditunjukkan transfeksi sementara sementara DNA linier lebih memilih transfeksi stabil. Inilah perbedaan antara transfeksi sementara dan stabil. Namun transfeksi sementara lebih umum dan mudah dibandingkan dengan transfeksi stabil. Tetapi pemilihan satu di antara dua tergantung pada tujuan transfer gen dan durasi proyek penelitian.

Referensi:
1. Condreay, J. Patrick, Sam M. Witherspoon, William C. Clay, dan Thomas A. Kost. "Ekspresi gen transien dan stabil dalam sel mamalia ditransduksi dengan vektor baculovirus rekombinan." Prosiding Akademi Ilmu Pengetahuan Nasional Amerika Serikat. Akademi Ilmu Pengetahuan Nasional, 05 Januari 1999. Web. 25 Mar 2017
2. Kim, Tae Kyung, dan James H. Eberwine. "Transfeksi sel mamalia: saat ini dan masa depan." Kimia Analitik dan Bioanalitik. Springer-Verlag, Agustus 2010. Web. 25 Mar 2017