Transformasi vs Transfeksi
Transformasi dan transfeksi adalah dua teknik sederhana yang digunakan untuk memperkenalkan gen asing ke dalam sel inang. Namun, teknik ini tergantung pada jenis host atau sistem vektor.
Apa itu Transformasi Sel?
Transformasi adalah teknik yang digunakan untuk memperkenalkan gen ke dalam sel ragi dan bakteri. Teknik ini biasanya menyebabkan perubahan gen yang diwariskan, dan dengan demikian ekspresi gen bersifat permanen. Transformasi bakteri pertama kali diperkenalkan pada tahun 1928 oleh Frederick Griffith. Kemudian pada awal 1970 - an, teknik ini digunakan di E. coli. Selama proses transformasi E. coli, sel-sel direndam dalam larutan CaCl yang sedingin es2. Langkah ini dibuat E.coli sel kompeten. Setelah itu, sel yang kompeten dicampur dengan DNA plasmid dan diinkubasi di atas es selama 20-30 menit. Kemudian kejutan panas singkat diberikan untuk memungkinkan transfer DNA ke dalam sel. Akhirnya, sel ditempatkan dalam kaldu nutrisi dan diinkubasi pada suhu 37 ° C selama 60-90 menit untuk membentuk plasmid. Setelah langkah-langkah ini berhasil diselesaikan, sel-sel yang ditransformasi dapat ditempatkan pada media yang cocok untuk propagasi sel. Karena transformasi dianggap sebagai teknik yang tidak efisien, maka transformasi tersebut tidak dapat digunakan untuk persiapan bank klon.
Apa itu Transfeksi Sel?
Transfeksi adalah metode pengenalan gen asing, biasanya, ke dalam sel mamalia. Ada dua metode transfeksi; yaitu transfeksi sementara dan transfeksi stabil. Dalam transfeksi sementara, ekspresi gen tersedia untuk waktu yang terbatas; dengan demikian, perubahan gen menyebabkan ekspresi sementara. Metode transfeksi ini sederhana dan cepat; karena itu dapat digunakan secara rutin. Salah satu kelemahan transfeksi sementara adalah sulitnya menerapkan sistem sintesis protein skala besar.
Selama transfeksi yang stabil, gen target diintegrasikan ke dalam genom sel inang, dan dengan demikian ekspresi gen bersifat permanen, tidak seperti transfeksi sementara.
Apa perbedaan antara Transformasi dan Transfeksi?
• Transformasi adalah pengenalan gen ke dalam sel prokariotik (bakteri dan ragi), sedangkan transfeksi biasanya disebut pengenalan gen ke dalam sel mamalia.
• Transformasi menghasilkan perubahan keturunan, pada gen, sedangkan transfeksi dapat menghasilkan ekspresi sementara atau perubahan permanen pada gen..