Perbedaan Antara RP HPLC dan HIC

Itu perbedaan utama antara RP HPLC dan HIC adalah itu RP HPLC menggunakan fase bergerak yang lebih polar dan fase stasioner yang kurang polar. Padahal, HIC menggunakan fase diam hidrofobik yang memungkinkan molekul hidrofob untuk melekat padanya.

Kromatografi adalah teknik analitik yang membantu memisahkan campuran menjadi komponen-komponennya. Pertama, kita harus melarutkan sampel untuk dipisahkan menjadi solusi. Campuran larutan-zat ini disebut fase gerak. Kemudian fase gerak dilewatkan melalui bahan lain yang disebut fase diam. Fase diam menentukan pemisahan komponen. Pemisahan terjadi karena pemartisian material antara fase gerak dan fase diam.

ISI

1. Ikhtisar dan Perbedaan Utama
2. Apa itu RP HPLC
3. Apa itu HIC
4. Perbandingan Berdampingan - RP HPLC vs HIC dalam Bentuk Tabular
5. Ringkasan

Apa itu RP HPLC?

Istilah RP HPLC singkatan Kromatografi Cair Kinerja Tinggi Berbalik. Ini melibatkan pemisahan komponen dalam campuran, sesuai dengan hidrofobik. Komponen hidrofobik dalam fasa gerak terhubung dengan ligan hidrofobik terimobilisasi pada fasa diam, sementara komponen hidrofilik mengelusi melalui fasa diam tanpa melekat pada permukaan fasa diam..

Gambar 01: Peralatan HPLC

Selain itu, metode ini memiliki reproduksibilitas lebih banyak dibandingkan dengan teknik kromatografi lainnya, dan ini menunjukkan penerapan yang luas juga. Oleh karena itu, kami menggunakan metode ini di laboratorium untuk lebih dari 75% dari semua metode HPLC. Sebagian besar waktu, kami menggunakan campuran air berair dengan pelarut organik polar larut sebagai fase gerak. Dengan demikian, itu akan memastikan pemasangan komponen hidrofobik dalam larutan ke permukaan fase diam.

Apa itu HIC?

Istilah HIC adalah singkatan Kromatografi Interaksi Hidrofobik. Ini adalah jenis HPLC fase terbalik, dan metode ini digunakan terutama untuk pemisahan biomolekul besar seperti protein. Dalam metode ini, kita perlu menggunakan media air untuk membuat sampel biomolekulnya. Itu karena pelarut organik dapat menyebabkan denaturasi protein. Selain itu, teknik ini menggunakan interaksi antara molekul besar dengan permukaan yang sedikit hidrofobik dari fase diam. Lebih jauh lagi, kita harus menggunakan konsentrasi garam yang tinggi dalam sampel karena mendorong protein untuk dipertahankan pada kemasan; proses ini disebut salting out. Dengan mengurangi konsentrasi garam secara bertahap, kita dapat membuat biomolekul terelusi secara terpisah sesuai dengan hidrofobisitasnya.

Biasanya, metode ini menggunakan kondisi yang berlawanan dengan kromatografi penukar ion. Dalam teknik ini, pertama, kita perlu melewatkan larutan buffer melalui kolom untuk mengurangi solvasi zat terlarut dalam sampel. Itu membuat daerah hidrofobik dari protein untuk mengekspos. Namun, ketika molekul lebih hidrofobik, lebih sedikit garam diperlukan untuk mempromosikan pengikatan. Di sini, lebih sedikit zat terlarut hidrofobik dielusi terlebih dahulu, dan menurut perubahan konsentrasi garam, lebih banyak zat terlarut hidrofobik terelusi terakhir.

Apa Perbedaan Antara RP HPLC dan HIC?

Kromatografi adalah teknik analisis untuk pemisahan komponen dalam suatu campuran. RP HPLC dan HIC adalah dua teknik kromatografi khusus. Perbedaan utama antara RP HPLC dan HIC adalah bahwa RP HPLC menggunakan fase gerak yang lebih polar dan fase diam yang lebih polar, sedangkan HIC menggunakan fase diam hidrofobik, yang memungkinkan molekul hidrofobik melekat padanya..

Infografis di bawah ini merangkum perbedaan antara HPLC RP dan HIC.

Ringkasan - RP HPLC vs. HIC

Kromatografi adalah teknik analisis untuk pemisahan komponen dalam suatu campuran. RP HPLC dan HIC adalah dua teknik kromatografi khusus. Perbedaan utama antara RP HPLC dan HIC adalah RP HPLC menggunakan fase gerak yang lebih polar dan fase diam yang kurang polar, sedangkan HIC menggunakan fase diam hidrofobik, yang memungkinkan molekul-molekul hidrofobik melekat padanya..

Referensi:

1. "Mode Pemisahan HPLC." Perairan, Tersedia di sini.

Gambar milik:

1. "HPLC Preparative" Oleh GYassineMrabetTalk & # x2709; Gambar vektor yang tidak ditentukan W3C ini dibuat dengan Inkscape. - Pekerjaan sendiri (CC BY 3.0) via Commons Wikimedia