Perbedaan Antara Fase Terbalik dan Fase Normal HPLC

Itu perbedaan utama antara fase balik dan fase normal HPLC adalah bahwa fase terbalik HPLC menggunakan fase diam polar dan fase gerak kurang polar sedangkan fase normal HPLC menggunakan fase diam nonpolar dan fase gerak polar.

HPLC fase normal adalah teknik HPLC tertua yang digunakan Tswett dalam pemisahan ekstrak tanamannya; dia menggunakan kapur di kolom kaca. Ini adalah mode klasik kromatografi yang menyebabkan penamaan sebagai teknik "normal". HPLC fase terbalik, di sisi lain, adalah kebalikan dari teknik normal, yang dikembangkan oleh para ilmuwan belakangan ini.

ISI

1. Ikhtisar dan Perbedaan Utama
2. Apa itu HPLC Fase Balik
3. Apa itu HPLC Fase Normal
4. Perbandingan Berdampingan - Fase Terbalik vs Fase Normal HPLC dalam Bentuk Tabular
5. Ringkasan

Apa itu HPLC Fase Balik?

Fase balik HPLC adalah teknik kromatografi di mana kami menggunakan fase diam hidrofobik. Di antara semua metode HPLC, kami menggunakan metode ini untuk sekitar 70% karena penerapannya yang luas, dan reproduktifitasnya. Fasa diam adalah nonpolar dan fase gerak adalah polar.

Sebagian besar waktu, para ilmuwan menggunakan campuran air berair dengan pelarut organik polar, seperti asetonitril atau metanol sebagai fase gerak. Oleh karena itu, analit berinteraksi dengan fase diam nonpolar.

Apa itu HPLC Fase Normal?

HPLC fase normal adalah teknik kromatografi di mana kami menggunakan fase diam hidrofilik. Ini adalah metode tradisional HPLC, meskipun kami tidak menggunakannya sebanyak itu. Fasa diam adalah polar, dan fase gerak adalah nonpolar. Lebih penting lagi, fase gerak dari teknik ini adalah 100% organik. Ini berarti tidak ada air yang digunakan untuk ini.

Gambar 01: Profil sampel untuk fase normal dan fase terbalik kromatogram HPLC sesuai dengan polaritas komponen dalam analit.

Biasanya, fase diam mengandung silika, siano, diol, fase ikatan amino, dll. Fasa gerak meliputi pelarut organik seperti heksana, etil asetat, dll. Teknik ini didasarkan pada retensi molekul pelarut atau analit ke fase diam polar..

Apa Perbedaan Antara Fase Terbalik dan Fase Normal HPLC?

Fase balik HPLC adalah teknik kromatografi di mana kami menggunakan fase diam hidrofobik. Fase diam dari teknik ini adalah nonpolar. Fasa diam adalah nonpolar sedangkan fase gerak adalah polar. Selain itu, para ilmuwan menggunakan campuran air berair dengan pelarut organik polar yang larut, seperti asetonitril atau metanol sebagai fase gerak dalam fase terbalik HPLC. Padahal, fase normal HPLC adalah teknik kromatografi di mana kami menggunakan fase diam hidrofilik. Fase diam dari teknik ini adalah polar. Fasa diam adalah polar sedangkan fase gerak adalah nonpolar. Selain itu, para ilmuwan menggunakan pelarut organik seperti heksana, etil asetat, dll. Sebagai fase gerak HPLC fase normal. Infografis di bawah ini menyajikan perbedaan antara fase terbalik dan fase normal HPLC dalam bentuk tabel.

Ringkasan - Fase Balik vs Fase Normal HPLC

Teknik HPLC fase balik dan fase normal adalah dua teknik kromatografi cair. Perbedaan antara fase balik dan fase normal HPLC adalah bahwa fase terbalik HPLC menggunakan fase diam polar dan fase gerak kurang polar sedangkan fase normal HPLC menggunakan fase diam nonpolar dan fase gerak polar.

Referensi:

1. Perairan. "Mode Pemisahan HPLC." Dijelaskan HPLC - Kromatografi Cair Kinerja Tinggi: Perairan. Tersedia disini