Perbedaan Antara Hibridisasi In Situ dan Imunohistokimia

Perbedaan Kunci - Hibridisasi In Situ vs Immunohistokimia
 

Diagnosis kanker dan penyakit menular adalah tren populer di mana teknik baru berbasis proteomik dan genomik digunakan untuk tujuan mengidentifikasi tumor atau sel menular, perkembangbiakannya dan tempat pengembangan sel serta menganalisis dasar genetika dari sebagian besar penyakit menular dan tidak menular. Ini akan menghasilkan pemrosesan dan perancangan obat yang akurat dan dalam mengembangkan terapi khusus untuk penyakit. Hibridisasi in situ (ISH) dan Immunohistokimia (IHC) adalah dua teknik yang digunakan secara luas dalam biologi kanker dan perbedaan utama antara hibridisasi in situ dan imunokimia terletak pada molekul yang digunakan dalam prosedur analisis. Dalam ISH, probe asam nukleat digunakan dalam analisis sedangkan, di IHC, antibodi monoklonal dan poliklonal digunakan untuk penentuan diagnostik.

ISI

1. Ikhtisar dan Perbedaan Utama
2. Apa itu Hibridisasi In Situ
3. Apa itu Imunohistokimia
4. Persamaan Antara Hibridisasi In Situ dan Imunohistokimia
5. Perbandingan Berdampingan - Hibridisasi In Situ vs Immunohistokimia dalam Bentuk Tabular
6. Ringkasan

Apa itu Hibridisasi In Situ (ISH)?

Hibridisasi in situ adalah teknik hibridisasi asam nukleat yang secara langsung dilakukan pada sebagian atau sebagian jaringan, di seluruh jaringan atau dalam sel. Teknik ini tergantung pada teori pasangan pasangan pelengkap Watson Crick, yang menghasilkan hibrid DNA-DNA atau hibrida DNA-RNA yang dapat mendeteksi gen yang bermutasi atau mengidentifikasi gen yang diinginkan. Urutan DNA untai tunggal, urutan DNA untai ganda, urutan RNA untai tunggal atau urutan oligonukleotida sintetis digunakan sebagai probe selama teknik hibridisasi, dan probe ini dilabeli dengan fosfor radioaktif pada ujung 5 'untuk prosedur identifikasi pada autoradiografi atau dilabeli menggunakan pewarna fluoresen . Ada berbagai jenis teknik ISH yang tersedia berdasarkan jenis penyelidikan yang digunakan dan jenis teknik visualisasi yang diikuti.

Gambar 01: Hibridisasi Fluorescent In Situ

Ada banyak aplikasi ISH, terutama dalam diagnostik molekuler penyakit menular untuk mengidentifikasi keberadaan patogen dan untuk mengkonfirmasi patogen melalui diagnostik molekuler. Ini juga digunakan dalam bidang biologi perkembangan, analisis kariotipe dan filogenetik dan pemetaan fisik kromosom.

Apa itu Immunohistokimia (IHC)?

Dalam teknik IHC, molekul utama yang dianalisis adalah antigen. Selama IHC, antibodi monoklonal dan poliklonal digunakan untuk menentukan keberadaan antigen pada infeksi atau status proliferasi sel ganas. Teknik ini didasarkan pada pengikatan antigen-antibodi, dan label enzim digunakan untuk teknik ini; salah satu aplikasi tersebut adalah ELISA (Enzyme linked immunosorbent assay). Penanda dapat juga berupa antibodi yang ditandai dengan neon atau antibodi berlabel radio.

Gambar 02: Imunohistokimia

IHC banyak digunakan untuk deteksi sel kanker. Prosedur diagnostik menargetkan antigen yang ada pada sel tumor untuk mengidentifikasi dan mengkarakterisasi tumor. Prosedur yang sama digabungkan untuk mendiagnosis agen infeksi. Antibodi monoklonal dan Poliklonal juga digunakan untuk menganalisis berbagai produk gen dengan mengaktifkan reaksi pengikatan antibodi-antigen antara protein yang diinginkan dan antibodi sintetis yang diberikan.

Apa Persamaan Antara Hibridisasi In Situ dan Imunohistokimia?

• ISH dan IHC adalah reaksi yang sangat spesifik.
• Kedua teknik ini sangat akurat.
• Kedua teknik dapat digunakan dalam diagnosa untuk kanker dan penyakit menular.
• Teknik-teknik ini dilakukan di lingkungan in-vitro yang steril.
• Keduanya adalah teknik cepat yang memberikan hasil yang dapat direproduksi.
• ISH dan IHC menggunakan metode deteksi seperti pelabelan radio, dan teknik fluoresensi.

Apa Perbedaan Antara Hibridisasi In Situ dan Imunohistokimia?

Hibridisasi In Situ vs Imunohistokimia
ISH adalah teknik hibridisasi asam nukleat yang secara langsung dilakukan pada sebagian atau sebagian jaringan atau seluruh jaringan.	IHC adalah teknik di mana antibodi monoklonal dan poliklonal digunakan untuk menentukan keberadaan antigen, yang merupakan penanda protein khusus yang ditempatkan pada permukaan sel.
Jenis Molekul Bio Yang Dianalisa
ISH menganalisis asam nukleat.	IHC menganalisis protein-antigen.
Dasar Reaksi Biokimia
Pasangan basa komplementer antara DNA-DNA atau DNA-RNA terjadi dalam teknik ini.	Interaksi antigen-antibodi terlibat dalam imunohistokimia.
Metode Pendeteksi Enzim Terkait
Metode deteksi tertaut enzim tidak dapat digunakan dalam ISH.	Metode deteksi tertaut enzim dapat digunakan di IHC.

Ringkasan - Hibridisasi In Situ vs Imunohistokimia

Diagnostik molekuler adalah metode cepat dan konfirmasi yang dapat digunakan untuk mengidentifikasi penyakit tidak menular seperti kanker atau penyakit menular seperti HIV atau Tuberkulosis berdasarkan penanda molekuler yang ada pada sel yang mengarah pada manifestasi penyakit. Penanda molekuler dapat hadir dalam bentuk protein yang diekspresikan atau pada tingkat genetik berdasarkan teknik novel yang berbeda diperkenalkan untuk meningkatkan efisiensi dan kurang melelahkan, meskipun ada biaya tinggi yang terlibat dengan teknik ini. Jadi ISH tergantung pada pembentukan hibrid DNA-DNA atau DNA-RNA, dan IHC tergantung pada reaksi spesifik antara antibodi dan antigen. Inilah perbedaan antara hibridisasi in situ.

Unduh Versi PDF Hibridisasi In Situ vs Immunohistokimia

Anda dapat mengunduh versi PDF dari artikel ini dan menggunakannya untuk tujuan offline sesuai catatan kutipan. Silakan unduh versi PDF di sini Perbedaan Antara Hibridisasi In Situ dan Imunohistokimia.

Referensi:

1. Duraiyan, Jeyapradha, dkk. "Aplikasi imunohistokimia." Jurnal Ilmu Farmasi & Bioallied, Medknow Publikasi & Media Pvt Ltd, Agustus 2012, Tersedia di sini. Diakses 24 Agustus 2017.
2. "Hibridisasi In Situ (ISH)". Pusat Nasional untuk Informasi Bioteknologi, Perpustakaan Kedokteran Nasional AS, Tersedia di sini. Diakses 24 Agustus 2017.

Gambar milik:

1. “FISH (Hibridisasi Fluorescent In Situ)” Oleh MrMatze - Pekerjaan sendiri (CC BY-SA 3.0) melalui Commons Wikimedia
2. “Immunohistochemicalstaining2” Oleh Imoen di Wikipedia bahasa Inggris (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia