Perbedaan Antara Noda Gram dan Cepat Asam

Perbedaan Utama - Gram Stain vs Asam Cepat

Bakteri adalah mikroorganisme yang sangat kecil. Mereka transparan, dan deteksi mereka sulit dalam kondisi hidup dan tidak ternoda. Dengan demikian, berbagai metode pewarnaan dikembangkan untuk memfasilitasi deteksi bakteri. Ada tiga jenis utama teknik pewarnaan: pewarnaan sederhana, pewarnaan diferensial, dan pewarnaan struktural. Pewarnaan diferensial adalah teknik yang menggunakan lebih dari satu pewarnaan untuk membedakan bakteri. Pewarnaan Gram dan pewarna asam-cepat paling dikenal sebagai pewarnaan diferensial. Pewarnaan Gram adalah teknik pewarnaan diferensial, yang memisahkan bakteri menjadi dua kelompok yang dikenal sebagai bakteri Gram-positif dan bakteri Gram-negatif. Pewarnaan asam-cepat adalah pewarnaan diferensial yang digunakan untuk mengidentifikasi organisme asam-cepat seperti Mycobacterium dari organisme non-asam cepat. Ini adalah perbedaan utama antara pewarnaan Gram dan pewarnaan Asam Cepat.

ISI

1. Ikhtisar dan Perbedaan Utama
2. Apa itu Gram Stain
3. Apa itu Asam Cepat
4. Kesamaan Antara Noda Gram dan Cepat Asam
5. Perbandingan Berdampingan - Noda Gram vs Asam Cepat dalam Bentuk Tabular
6. Ringkasan

Apa itu Gram Stain?

Pewarnaan Gram adalah teknik pewarnaan diferensial penting yang digunakan untuk identifikasi bakteri dalam mikrobiologi. Teknik ini diperkenalkan oleh Bakteriolog Denmark Hans Christian Gram pada tahun 1884. Pewarnaan Gram mengkategorikan bakteri menjadi dua kelompok besar bernama gram positif dan gram negatif, yang sangat penting dalam klasifikasi dan identifikasi bakteri. Ahli mikrobiologi melakukan pewarnaan gram sebagai langkah awal dalam karakterisasi bakteri selama studi mereka.

Bakteri dikelompokkan berdasarkan perbedaan di dinding sel mereka. Bakteri gram positif terdiri dari lapisan peptidoglikan yang tebal di dinding selnya, sedangkan bakteri gram negatif tersusun dari lapisan peptidoglikan yang tipis di dinding selnya. Hasil pewarnaan gram akan didasarkan pada perbedaan ketebalan lapisan peptidoglikan dinding sel.

Pewarnaan Gram dilakukan dengan menggunakan empat reagen yang berbeda yaitu; pewarnaan primer, mordan, zat penghilang warna dan pewarnaan balik. Kristal violet dan safranin digunakan sebagai pewarna primer dan pewarna, masing-masing sedangkan gram yodium dan alkohol 95% digunakan sebagai mordan dan dekolourizer. Langkah-langkah dasar pewarnaan gram adalah sebagai berikut;

Apusan bakteri disiapkan pada slide kaca yang bersih, dipanaskan dan didinginkan.
Apusan dibanjiri dengan kristal violet selama 1 - 2 menit.
Poles dibilas dengan air keran yang mengalir lambat untuk menghilangkan noda berlebih.
Gram yodium dioleskan ke apusan selama 1 menit.
Apusan dibilas dengan air leding yang lambat
Poles dicuci dengan alkohol 95% selama 2 - 5 detik dan dibilas dengan air leding yang lambat.
Polesan konter diwarnai dengan safranin selama 1 menit
Apusan dibilas dengan air keran yang mengalir lambat, dikeringkan dan diamati di bawah mikroskop.

Pada akhir pewarnaan gram, bakteri gram negatif akan diamati dalam warna pink sedangkan bakteri gram positif akan diamati dalam warna ungu.

Gambar 01: Bakteri Gram negatif dan Gram positif

Hasil pewarnaan gram ditentukan oleh ketebalan lapisan peptidoglikan di dinding sel mereka. Selama langkah dekolorisasi, pewarnaan primer dan mordan mudah dihilangkan dari bakteri gram negatif dan menjadi tidak berwarna karena memiliki lapisan peptidoglikan yang tipis. Noda primer dipertahankan dalam bakteri gram positif karena memiliki lapisan peptidoglikan yang tebal. Penghilang noda tidak akan efektif untuk bakteri gram positif karena retensi pewarnaan primer. Dengan demikian, gram bakteri positif akan terlihat dalam warna noda primer, yaitu, warna ungu. Noda pencacah akan menodai bakteri gram negatif, dan mereka akan terlihat dalam warna pilih, yang merupakan warna safranin. Oleh karena itu, mudah untuk mengkategorikan bakteri menjadi dua kelompok berdasarkan pewarnaan gram dan itu berharga dalam diferensiasi dan identifikasi bakteri.

Apa itu Asam Cepat?

Tahan luntur asam adalah sifat fisik bakteri tertentu, khususnya ketahanannya terhadap dekolorisasi oleh asam selama prosedur pewarnaan. Setelah diwarnai, organisme ini menahan prosedur dekolorisasi berbasis asam dan atau etanol yang umum dalam banyak protokol pewarnaan. Dengan demikian, nama 'asam cepat' diberikan kepada organisme tersebut. Properti ini ditunjukkan karena memiliki tingkat tinggi bahan lilin (asam mikolik) di dinding sel mereka. Tes ini sangat penting untuk identifikasi Mycobacterium tuberculosis.

Gambar 2: Mycobacteria Cepat Asam

Pewarnaan cepat asam ini dikembangkan oleh Paul Ehrlich pada tahun 1882. Teknik cepat asam Ehrlich dimodifikasi oleh Ziehl-Neelsen dan sekarang lebih sering digunakan. Prosedur pewarnaan cepat asam melibatkan tiga reagen yang berbeda. Karbol fuschin digunakan sebagai pewarna primer. Alkohol asam digunakan sebagai zat penghilang warna. Methylene Blue digunakan sebagai penghitung noda. Prosedur pewarnaan dilakukan sebagai berikut.

Noda primer (carbol fuchsin) diterapkan pada spesimen tetap pada slide (Semua sel akan diwarnai dengan warna merah).
Slide dipanaskan dengan mengukus selama 5 menit, yang mendorong noda ke dalam sel dengan benar.
Kemudian larutan dekolorisasi ditambahkan (Ini menghilangkan pewarna merah dari semua sel kecuali bakteri asam cepat).
Methylene blue ditambahkan sebagai counter stain (Ini mewarnai semua sel bakteri yang tidak berwarna).
Bakteri cepat asam tetap merah sementara bakteri cepat nonacid bernoda biru.

Apa Persamaan Antara Pewarnaan Gram dan Cepat Asam?

Pewarnaan Gram dan Asam cepat adalah dua teknik pewarnaan diferensial.
Kedua teknik mengkategorikan bakteri menjadi dua kelompok.
Kedua teknik menggunakan dua noda dan satu menghilangkan warna.

Apa Perbedaan Antara Noda Gram dan Cepat Asam?

Gram Stain vs Asam Cepat
Pewarnaan Gram adalah teknik pewarnaan diferensial, yang memisahkan bakteri menjadi dua kelompok, yaitu bakteri Gram-positif dan bakteri Gram-negatif.	Pewarnaan Asam Cepat adalah pewarnaan diferensial yang digunakan untuk mengidentifikasi organisme tahan asam dari organisme bukan asam cepat.
Noda Primer
Kristal violet adalah pewarna primer yang umum digunakan dalam pewarnaan gram.	Karbol fuchsin adalah pewarna utama yang digunakan dalam asam cepat.
Agen penghilang warna
Alkohol 95% digunakan sebagai zat penghilang warna dalam pewarnaan gram.	Alkohol asam digunakan sebagai zat penghilang warna dalam asam cepat.
Counter Stain
Pewarnaan Gram menggunakan safranin sebagai pewarna penghitung.	Pewarnaan cepat asam menggunakan biru metilen sebagai pewarnanya.
Pengamatan
Bakteri gram negatif diamati dalam warna pilih dan bakteri gram positif diamati dalam warna ungu.	Bakteri Asam Cepat diamati dalam warna merah dan bakteri non-asam cepat diamati dalam warna biru.

Ringkasan - Gram Stain vs Asam Cepat

Visualisasi mikroorganisme dalam keadaan hidup sulit. Oleh karena itu, pewarnaan biologis dan prosedur pewarnaan digunakan secara luas untuk mempelajari sifat-sifatnya. Pewarnaan diferensial adalah salah satu jenis teknik pewarnaan yang digunakan untuk membedakan bakteri. Pewarnaan Gram dan pewarnaan cepat asam adalah dua teknik pewarnaan diferensial. Pewarnaan gram membedakan bakteri gram negatif dan bakteri gram positif berdasarkan ketebalan dinding sel mereka. Pewarnaan asam cepat membedakan bakteri asam cepat dari bakteri tidak asam cepat berdasarkan kandungan asam mikolik di dinding sel. Ini adalah perbedaan antara asam cepat dan pewarnaan gram.

Unduh Versi PDF dari Gram Stain vs Acid Fast

Anda dapat mengunduh versi PDF dari artikel ini dan menggunakannya untuk tujuan offline sesuai catatan kutipan. Silakan unduh versi PDF di sini Perbedaan Antara Noda Gram dan Asam Cepat.

Referensi:

1. Aryal, Sagar. “Noda Asam-Cepat, Prinsip, Prosedur, Interpretasi, dan Contoh.” Catatan Mikrobiologi Online. N.p., 08 Mei 2017. Web. Tersedia disini. 20 Juli 2017.
2. Noda Diferensial untuk Mengidentifikasi Bakteri: Gram, Asam-cepat & Endospore. N.p., n.d. Web. Tersedia disini. 20 Juli 2017.

Gambar milik:

1. “Kelenjar getah bening - Infeksi mikobakteri atipikal (MAI) - pewarnaan AFB” oleh Yala Rosen (CC BY-SA 2.0) via Flickr
2. "Gram stain 01" Oleh Y tambe - File Y tambe (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia

Sains & Alam