Colony forming unit (CFU) dan Most Probable number (MPN) adalah dua metode yang digunakan untuk menghitung mikroorganisme dalam sampel. Kedua parameter digunakan untuk mendeteksi kualitas air dan bakteri indikator tinja dalam sampel air. Unit pembentuk koloni adalah ukuran yang digunakan untuk menghitung jumlah sel bakteri atau sel jamur yang hidup dalam volume atau berat tertentu dari sampel yang diberikan. Unit standar untuk parameter ini adalah CFU / ml atau CFU / g. Angka yang paling mungkin adalah unit lain yang digunakan untuk mengukur jumlah sel bakteri yang aktif dalam sampel cair. Perbedaan utama antara CFU dan MPN adalah itu CFU dihitung dari koloni bakteri dan jamur yang tumbuh di piring agar padat sementara MPN dihitung dari bakteri yang hidup tumbuh dalam media cair.
1. Ikhtisar dan Perbedaan Utama
2. Apa itu CFU
3. Apa itu MPN
4. Perbandingan Berdampingan - CFU vs MPN dalam Bentuk Tabular
5. Ringkasan
Unit pembentuk koloni (CFU) adalah parameter yang mengukur jumlah sel bakteri atau jamur dalam sampel yang diberikan. Metode yang menghitung satuan pembentuk koloni disebut hitungan plat standar. Koloni yang hidup yang muncul pada pelat agar dinyatakan sebagai CFU per 1 ml (unit pembentuk koloni per mililiter) sampel untuk cairan atau CFU per 1 g (unit pembentuk koloni per satu gram) sampel untuk padatan.
Ada dua metode umum yang digunakan untuk mengukur CFU dalam sampel. Mereka metode piring menyebar dan metode tuang piring. Kedua metode ini didukung oleh teknik yang disebut pengenceran serial. Sampel yang diencerkan secara serial memungkinkan diperolehnya jumlah koloni yang cukup banyak pada permukaan agar. Volume sampel yang diketahui dapat menyebar ke permukaan piring agar-agar, atau dicampur dengan agar-agar dan dituangkan ke atas piring. Piring kemudian diinkubasi dan koloni yang muncul dihitung. Jumlah koloni berhubungan dengan jumlah mikroorganisme dalam sampel asli. Pelat yang menunjukkan terlalu banyak koloni atau terlalu sedikit koloni dikeluarkan dari penghitungan karena hasilnya mungkin tidak akurat secara statistik pada lempeng tersebut. Secara statistik, kisaran terbaik adalah 30 - 300 koloni di piring agar-agar. Oleh karena itu, pelat yang benar harus dipilih untuk penghitungan yang akurat. Pengenceran serial dilakukan untuk fungsi di atas.
Setelah Anda menghitung jumlah koloni yang hidup di piring, CFU / ml dapat dihitung menggunakan persamaan berikut.
CFU per ml sampel asli = jumlah koloni pada faktor pengenceran pelat X
Faktor pengenceran = (1 / Pengenceran piring)
Misalnya, jika Anda mendapatkan 149 koloni di piring 10-4 pengenceran, maka jumlah bakteri dalam 1 ml sampel asli dapat dihitung sebagai berikut:
CFU / ml = (149) x (1/10-4)
= 149 × 104 atau 1490000
= 1. 49 x 106
Gambar 01: Unit Pembentuk Koloni
Itu nomor yang paling mungkin adalah ukuran alternatif untuk CFU / ml. MPN juga memperkirakan sel-sel yang layak dalam sampel cair. Ini menghitung organisme yang tumbuh dalam kultur cair dan merupakan teknik bakteriologis yang dominan. Metode ini sangat berguna untuk sampel yang mengandung sel bakteri konsentrasi rendah; misalnya, susu, air minum, dll. Nilai MPN dinyatakan untuk 100 ml volume. MPN mengandalkan metode statistik berdasarkan teori probabilitas. Ada tabel statistik yang dirancang untuk menemukan nilai MPN per 100 ml sampel. Tabel ini menunjukkan hasil pada batas kepercayaan 95%.
Nilai MPN dihitung setelah melakukan teknik yang disebut metode fermentasi beberapa tabung. Tiga set tabung berisi media kultur yang sesuai diinokulasi dengan tiga volume sampel yang berbeda seperti 10 ml, 1 ml, dan 0,1 ml dan diinkubasi untuk pertumbuhan. Setelah masa inkubasi, tabung diberi skor + (positif) atau - (negatif) untuk ada tidaknya pertumbuhan. Pola hasil positif dan negatif kemudian dibandingkan dengan tabel probabilitas statistik MPN untuk memperkirakan jumlah mikroorganisme. Kemudian nilai MPN diberikan untuk 100 ml sampel. MPN banyak digunakan untuk mendeteksi bakteri coliform yang ada dalam sampel air.
Gambar 02: Tabel MPN
CFU vs MPN | |
CFU adalah ukuran yang digunakan untuk menyatakan jumlah koloni bakteri atau jamur dalam sampel yang diberikan. | MPN adalah ukuran alternatif untuk CFU dan mengukur jumlah sel bakteri yang aktif dalam sampel cair. |
Satuan | |
CFU / ml atau CFU / g | MPN / 100 ml |
Perhitungan | |
CFU dihitung dengan menghitung jumlah koloni yang ditanam pada agar-agar. | MPN dihitung dengan membandingkan pola positif dan negatif tabung dengan tabel statistik MPN. |
Teknik Pengenceran Serial | |
Pengenceran serial dilakukan sebelum menempatkan sampel pada pelat agar. | Pengenceran serial biasanya tidak dilakukan saat MPN dihitung |
Metode | |
Metode spread plate dan pour plate method adalah dua jenis metode yang dilakukan untuk mendapatkan CFU. | Fermentasi tabung multipel adalah metode yang dilakukan untuk mendapatkan nilai MPN. |
Mengukur pertumbuhan mikroba diperlukan karena berbagai alasan. Di pabrik pengolahan makanan, perlu untuk mengukur tingkat & jenis mikroorganisme dalam makanan. Dalam industri makanan dan obat-obatan, perlu untuk memastikan bahwa perawatan sterilisasi diterapkan secara efektif. Di pabrik pengolahan limbah, diperlukan untuk mengambil jumlah mikroba secara rutin. Ketika mengoptimalkan prosedur dalam biologi molekuler, diperlukan untuk mengukur jumlah koloni di piring. Oleh karena itu, ada berbagai metode enumerasi dan pengukuran pertumbuhan yang tersedia. CFU dan MPN adalah dua metode yang banyak diadopsi di berbagai bidang. CFU adalah ukuran jumlah koloni bakteri dan jamur yang ada dalam sampel yang diberikan. Ini dihitung dengan menggunakan metode penghitungan pelat standar atau metode penghitungan pelat yang layak. MPN adalah ukuran lain yang menyatakan jumlah sel bakteri yang ada dalam volume sampel cairan tertentu. Itu dihitung menggunakan metode fermentasi tabung ganda dan tabel MPN. Inilah perbedaan antara CFU dan MPN.
Anda dapat mengunduh versi PDF dari artikel ini dan menggunakannya untuk tujuan offline sesuai catatan kutipan. Silakan unduh versi PDF di sini Perbedaan Antara CFU dan MPN.
"Unit pembentuk koloni." Wikipedia. Wikimedia Foundation, 28 Mei 2017. Web. Tersedia disini. 01 Juni 2017.
"Mikrobiologi - 014 - Angka Yang Paling Mungkin." Mikrobiologi - 014 - Nomor Kemungkinan Terbanyak | Program Sarjana Mikrobiologi. N.p., n.d. Web. Tersedia disini. 01 Juni 2017.
1. ” Penghitungan CFU manual ”Oleh Quentin Geissmann - Pekerjaan sendiri (CC BY-SA 3.0) melalui Commons Wikimedia
2. “OSC Microbio 00 EE MPNTable” Oleh CNX OpenStax - (CC BY 4.0) melalui Commons Wikimedia