Perbedaan Antara Elektroforesis Kapiler dan Elektroforesis Gel
Share
Perbedaan Kunci - Elektroforesis Kapiler vs Elektroforesis Gel
Elektroforesis adalah teknik yang digunakan untuk memisahkan biomolekul berdasarkan muatan partikel, ukuran partikel, dan bentuk partikel. Migrasi molekul, dikenal sebagai mobilitas elektroforesis, tergantung pada jenis polimer / gel yang digunakan, ukuran pori-nya, tegangan yang diberikan, waktu berjalan dan rasio permukaan terhadap volume. Ada berbagai jenis teknik elektroforesis berdasarkan pada jenis biomolekul yang digunakan. Jenis elektroforesis pertama yang ditemukan adalah kertas elektroforesis di mana kertas nitroselulosa digunakan sebagai media untuk pemisahan biomolekul. Prinsip elektroforesis gel di mana gel ukuran pori yang berbeda digunakan untuk memisahkan biomolekul, ditemukan kemudian. Teknik elektroforesis gel lebih lanjut dimodifikasi untuk meningkatkan akurasi teknik, dan salah satu modifikasi tersebut adalah elektroforesis kapiler. Perbedaan utama antara elektroforesis kapiler dan elektroforesis gel adalah bahwa gel elektroforesis dilakukan dalam bidang vertikal atau horizontal menggunakan gel polimer ukuran pori standar sedangkan elektroforesis kapiler dilakukan dalam tabung kapiler dengan cairan polimer atau gel.
ISI
1. Ikhtisar dan Perbedaan Utama
2. Apa itu Elektroforesis Gel
3. Apa itu Elektroforesis Kapiler
4. Kesamaan Antara Elektroforesis Kapiler dan Elektroforesis Gel
5. Perbandingan Berdampingan - Elektroforesis Kapiler vs Elektroforesis Gel dalam Bentuk Tabular
6. Ringkasan
Apa itu Elektroforesis Gel?
Elektroforesis gel adalah teknik yang digunakan untuk memisahkan terutama asam nukleat, protein atau asam amino berdasarkan muatan, ukuran, dan bentuknya. Teknik ini menggunakan gel fisik, yang merupakan zat polimer, sebagai media pemisahan. Gel yang paling sering digunakan adalah Agarose (untuk pemisahan asam nukleat) dan Polyacrylamide (untuk pemisahan protein). Aparat elektroforesis gel berisi baki gel gel untuk menyiapkan gel, sisir casting untuk mempersiapkan sumur, tangki penyangga, elektroda - positif (anoda) dan negatif (katoda) dan unit suplai tegangan. Molekul seperti DNA atau RNA, yang bermuatan negatif, bergerak dari katoda ke anoda dan molekul yang bermuatan positif bergerak sebaliknya. Persiapan gel dilakukan sesuai dengan kebutuhan. Jika resolusi tinggi atau pemisahan molekul diperlukan, gel konsentrasi tinggi dengan ukuran pori yang lebih rendah harus disiapkan. Molekul-molekul yang dipisahkan pada matriks gel diamati setelah teknik pewarnaan. Molekul yang terpisah muncul sebagai pita pada matriks gel.
Gambar 01: Gel Elektroforesis
Elektroforesis gel digunakan dalam diagnostik molekuler seperti sidik jari DNA untuk menentukan keberadaan fragmen DNA / RNA tertentu atau protein. Elektroforesis gel juga menentukan kemurnian sampel biomolekul yang diekstraksi. Elektroforesis gel dilakukan sebagai langkah awal untuk in dan hibridisasi dan sebagai analisis konfirmasi setelah pengurutan.
Apa itu Elektroforesis Kapiler?
Elektroforesis kapiler adalah modifikasi dari elektroforesis gel yang menggunakan prinsip pemisahan yang sama berdasarkan muatan, ukuran molekul, tetapi dilakukan dalam tabung kapiler dengan zat gel atau polimer cair. Kapiler dibuat dari silika leburan, dan setiap tabung kapiler memiliki diameter internal 50-100μm dan panjang 25-100cm. Sampel disuntikkan ke dalam tabung kapiler yang mengandung bahan polimer dan dipisahkan jauh lebih cepat daripada elektroforesis gel konvensional. Sistem kapiler terlindungi dengan baik di dalam jaket isolator yang melindungi sampel dari kontaminasi apa pun. Kapiler dapat diisi dengan polimer cair seperti hidroksietil selulosa atau gel resolusi tinggi seperti poliakrilamida. Elektroforesis kapiler memberikan resolusi yang lebih besar; karenanya pemisahan lebih akurat. Elektroforesis kapiler menggunakan sistem detektor otomatis melalui analisis spektrofotometri. Ini karena rasio luas permukaan yang lebih tinggi.
Gambar 02: Elektroforesis Kapiler
Elektroforesis kapiler digunakan dalam situasi seperti dalam forensik di mana akurasi yang lebih tinggi diperlukan dan tidak umum digunakan karena merupakan teknik yang mahal.
Apa Persamaan Antara Elektroforesis Kapiler dan Elektroforesis Gel?
- Pemisahan molekul dalam kedua teknik didasarkan pada muatan dan ukuran molekul.
- Kedua teknik dapat digunakan untuk memisahkan asam nukleat dan protein.
- Volume sampel dari kedua teknik adalah sama.
- Kedua teknik menggunakan buffer untuk memfasilitasi pemisahan.
Apa Perbedaan Antara Elektroforesis Kapiler dan Elektroforesis Gel?
Elektroforesis Kapiler vs Gel Elektroforesis | |
| Elektroforesis kapiler adalah teknik yang memisahkan biomolekul pada tabung kapiler menggunakan media polimer cair atau gel. | Gel elektroforesis adalah teknik yang memisahkan biomolekul pada bidang vertikal atau horizontal menggunakan media gel polimer. |
| Pemisahan | |
| Dalam elektroforesis kapiler, pemisahan dilakukan di dalam tabung kapiler. | Dalam elektroforesis gel, pemisahan dilakukan pada bidang vertikal atau horizontal. |
| Medium Pemisahan | |
| Polimer cair seperti hidroksietilselulosa digunakan dalam elektroforesis kapiler. | Gel, baik agarosa atau poliakrilamida, digunakan sebagai media dalam elektroforesis gel. |
| Cross Linkage | |
| Resolusi tinggi dapat diperoleh dari elektroforesis kapiler. | Resolusi rendah dalam elektroforesis gel. |
| Rasio Luas Permukaan ke Volume | |
| Rasio permukaan terhadap volume tinggi dalam elektroforesis kapiler. | Rasio permukaan terhadap volume adalah elektroforesis gel yang rendah. |
| Teknik Deteksi | |
| Deteksi dilakukan melalui detektor otomatis spektrofotometri dalam elektroforesis kapiler. | Pewarnaan dan pengamatan melalui transilluminator UV dilakukan sebagai teknik pendeteksian dalam elektroforesis gel. |
Ringkasan - Elektroforesis Kapiler vs Gel Elektroforesis
Diagnostik molekuler memainkan peran utama dalam dunia ilmiah. Identifikasi dan pemurnian DNA, RNA, dan Protein adalah langkah penting dalam prosedur diagnostik. Elektroforesis adalah teknik yang memisahkan dan mengidentifikasi biomolekul dalam elektroforesis gel dan elektroforesis gel kapiler yang jauh lebih maju. Elektroforesis gel dilakukan dalam bidang vertikal atau horisontal menggunakan gel polimer ukuran pori standar sedangkan elektroforesis kapiler dilakukan dalam tabung kapiler dengan cairan polimer atau gel. Ini adalah perbedaan antara elektroforesis kapiler dan elektroforesis gel. Setelah menyelesaikan teknik elektroforesis, biomolekul selanjutnya diproses untuk mendapatkan informasi tingkat yang lebih tinggi melalui hibridisasi atau melalui teknik seperti sidik jari.
Unduh Versi PDF dari Elektroforesis Kapiler vs Elektroforesis Gel
Anda dapat mengunduh versi PDF dari artikel ini dan menggunakannya untuk tujuan offline sesuai catatan kutipan. Silakan unduh versi PDF di sini Perbedaan Antara Elektroforesis Gel dan Elektroforesis Kapiler.
Referensi:
1. Durney, Brandon C., et al. "Elektroforesis kapiler diterapkan pada DNA: menentukan dan memanfaatkan urutan dan struktur untuk memajukan bioanalisis (2009-2014)." Kimia Analitik dan Bioanalitik, Springer Berlin Heidelberg, 2015, Tersedia di sini. Diakses 28 Agustus 2017.
2. "Elektroforesis." University of Leicester, 8 Jan 2009, Tersedia di sini. Diakses 28 Agustus 2017.
3. "Elektroforesis gel." Khan Academy, Tersedia di sini. Diakses 28 Agustus 2017.
Gambar milik:
1. "Elektroforesis gel Agarosa DNA" Oleh School of Natural Resources dari Ann Arbor - laboratorium DNA (CC BY 2.0) via Commons
2. "Skema Instrumen Elektroforesis Gel Kapiler" Oleh Chem4066sp13 - Pekerjaan sendiri (CC BY-SA 3.0) melalui Commons Wikimedia
