Perbedaan Antara Bradford dan Lowry Protein Assay
Share
Itu perbedaan utama antara bradford dan uji protein lowry adalah itu Uji protein Bradford didasarkan pada pergeseran absorbansi zat warna Coomassie brilliant blue G-250 sedangkan uji Lowry protein didasarkan pada reaksi ion tembaga (Cu +) yang dihasilkan oleh oksidasi ikatan peptida dengan reagen Folin-Ciocalteu.
Assay adalah teknik analitik yang membantu untuk mengkarakterisasi komponen fungsional utama sampel. Oleh karena itu, pengujian dapat berupa tes kualitatif atau kuantitatif. Banyak bidang termasuk kedokteran laboratorium, farmakologi, biologi lingkungan, biologi molekuler, biokimia, dan imunologi menggunakan tes semacam ini secara rutin. Uji kadar Bradford dan Lowry adalah dua uji biokimiawi yang menentukan konsentrasi protein dalam larutan sampel. Kedua tes menggunakan teknik kolorimetri untuk memberikan hasil.
ISI
1. Ikhtisar dan Perbedaan Utama
2. Apa itu Bradford Protein Assay
3. Apa itu Uji Lowry Protein
4. Kesamaan Antara Bradford dan Lowry Protein Assay
5. Perbandingan Berdampingan - Tes Bradford vs Lowry Protein dalam Bentuk Tabular
6. Ringkasan
Apa itu Bradford Protein Assay?
Uji protein Bradford adalah prosedur analitik spektroskopi cepat untuk analisis protein. Ini menunjukkan akurasi tinggi ketika mengukur konsentrasi protein dalam suatu larutan. Marion Bradford memperkenalkan prosedur ini pada tahun 1976. Dalam pengujian ini, reaksi total didasarkan pada komposisi asam amino dari protein yang diukur. Dalam istilah lain, uji protein Bradford adalah uji kolorimetri. Itu menggunakan pewarna Coomassie biru cemerlang. Oleh karena itu, uji protein kolorimetri ini tergantung pada pergeseran absorbansi zat warna. Coomassie blue brilian G-250 ada dalam tiga format: kationik (merah), anionik (biru) dan netral (hijau). Selama kondisi asam, bentuk merah pewarna dikonversi menjadi biru. Ini menegaskan pengikatan protein. Jika protein tidak ada, solusinya mungkin tetap dalam warna coklat.
Gambar 01: Uji protein Bradford
Uji protein Bradford berbeda dari uji protein lain karena kurang rentan terhadap gangguan berbagai senyawa kimia yang ada dalam larutan protein. Senyawa ini termasuk natrium, kalium, glukosa, dan sukrosa, dll.
Apa itu Uji Lowry Protein??
Uji protein rendah adalah uji biokimiawi yang digunakan untuk menentukan tingkat total protein dalam suatu larutan. Oliver H. Lowry adalah orang yang mengembangkan reagen ini pada tahun 1940. Prosedur ini menggambarkan konsentrasi total protein larutan dengan perubahan warna yang sebanding dengan konsentrasi protein dalam larutan. Oleh karena itu, ini juga merupakan uji protein kolorimetri.
Reaksi antara ion tembaga (Cu +) yang dihasilkan oleh oksidasi ikatan peptida dan reagen Folin-Ciocalteu adalah dasar dari prosedur ini. Juga, reagen ini mengandung asam fosfomolibdat dan asam fosfat-tungstat. Namun, mekanisme reaksi uji protein Lowry tidak dipahami dengan baik. Tetapi itu melibatkan oksidasi residu sistein, triptofan dan tirosin dengan reduksi reagen Folin-Ciocalteu.
Gambar 02: Pengujian protein rendah
Residu sistein berkontribusi terhadap absorbansi yang diamati dalam uji protein Lowry dan hasil reaksi dalam molekul biru yang cemerlang; heteropoly molybdenum blue. Pengurangan molekul ini diukur dengan absorbansi pada 660nm. Oleh karena itu, konsentrasi residu sistein dan triptofan yang mengurangi reagen Folin-Ciocalteu mengurangi konsentrasi total protein dalam larutan..
Apa Persamaan Antara Bradford dan Lowry Protein Assay?
- Tes Bradford dan Lowry protein menentukan konsentrasi protein dalam suatu larutan.
- Kedua metode adalah metode colourimetric.
- Juga, sensitivitas kedua metode ini tinggi.
Apa Perbedaan Antara Bradford dan Lowry Protein Assay?
Bradford dan Lowry protein assay adalah dua jenis pengujian yang menentukan konsentrasi protein dalam suatu larutan. Uji protein Bradford bergantung pada pergeseran absorbansi zat warna Coomassie blue brilian G-250 sedangkan uji protein Lowry tergantung pada reaksi ion tembaga yang dihasilkan oleh oksidasi ikatan peptida, dengan reagen Folin-Ciocalteu. Jadi, ini adalah perbedaan utama antara pengujian protein Bradford dan Lowry. Uji protein Bradford membutuhkan waktu 15 menit untuk menghasilkan suatu hasil sedangkan uji protein Lowery membutuhkan waktu 40-60 menit untuk menghasilkan suatu hasil. Dengan demikian, ini adalah perbedaan lain antara tes Bradford dan Lowry protein. Selanjutnya, uji protein Bradford tergantung pada komposisi asam amino sedangkan uji protein Lowry sebagian tergantung pada komposisi asam amino. Oleh karena itu, ini juga merupakan perbedaan antara uji Bradford dan Lowry protein.
Inforaphic di bawah ini memberikan detail lebih lanjut tentang perbedaan antara Bradford dan Lowry protein assay.
Ringkasan - Bradford vs Lowry Protein Assay
Assay adalah teknik analisis yang digunakan untuk mengkarakterisasi komponen fungsional utama sampel. Bradford dan Lowry protein assay adalah dua jenis pengujian protein yang berfungsi di bawah teknik kolorimetri. Kedua tes Bradford dan Lowry protein menentukan konsentrasi protein dalam suatu larutan. Namun, perbedaan utama antara Bradford dan Lowry Protein Assay terletak pada teknik kolorimetri yang mereka gunakan. Uji protein Bradford menggunakan Coomassie blue brilian G-250 sedangkan uji protein Lowry menggunakan ion tembaga (Cu +) dan reagen Folin-Ciocalteu. Selain itu, metode Bradford memberikan hasil yang lebih cepat daripada uji protein Lowry. Namun, kedua metode ini adalah metode yang sangat sensitif dan dapat diintervensi dari berbagai zat.
Referensi:
1. "Jurnal Kanada Botani." Canadian Journal of Botany - 60 (7): 1046 - PDF, Tersedia di sini.
2. "Pemeriksaan Kimia Protein." Thermo Fisher Scientific - AS, Tersedia di sini.
Gambar milik:
1. "Bradford protein assay" Oleh Helito - Pekerjaan sendiri (CC BY-SA 4.0) melalui Commons Wikimedia
