Perbedaan Antara Afinitas dan Pertukaran Ion Kromatografi

Itu perbedaan utama antara afinitas dan pertukaran ion kromatografi adalah itu kita dapat menggunakan kromatografi afinitas untuk memisahkan komponen bermuatan atau tidak bermuatan dalam campuran sedangkan kita dapat menggunakan kromatografi penukar ion untuk memisahkan komponen bermuatan dalam campuran.

Kromatografi adalah teknik yang dapat kita gunakan untuk memisahkan komponen yang diinginkan dalam suatu campuran. Ada berbagai jenis seperti kromatografi cair, kromatografi gas, dll. Kromatografi afinitas dan kromatografi pertukaran ion adalah dua subkategori kromatografi cair. Juga, dalam teknik ini, ada dua fase. Yakni, mereka adalah fase diam dan fase bergerak. Tujuan dari teknik ini adalah untuk memisahkan komponen, tergantung pada pengikatan komponen, dalam fase gerak ke permukaan fase diam..

ISI

1. Ikhtisar dan Perbedaan Utama
2. Apa itu Affinity Chromatography
3. Apa itu Kromatografi Penukar Ion
4. Perbandingan Berdampingan - Kromatografi Pertukaran Afinitas vs Ion dalam Bentuk Tabular
5. Ringkasan

Apa itu Affinity Chromatography?

Kromatografi afinitas adalah teknik biokimia yang kami gunakan untuk memisahkan komponen dalam campuran tergantung pada interaksi antara komponen-komponen ini.

Interaksi yang kami gunakan dalam kasus ini meliputi yang berikut:

1. Interaksi antigen-antibodi
2. Interaksi enzim-substrat
3. Interaksi reseptor-ligan
4. Interaksi asam protein-nukleat

Dalam teknik ini, kami menggunakan sifat molekul dari molekul untuk teknik pemisahan ini. Di sini, kami mengizinkan senyawa yang diinginkan untuk berinteraksi dengan fase diam melalui ikatan hidrogen, interaksi ionik, jembatan disulfida, interaksi hidrofobik, dll. Molekul yang tidak berinteraksi dengan fase diam akan terelusi terlebih dahulu. Jadi, kita bisa memisahkannya dari campuran. Senyawa yang diinginkan akan tetap melekat pada fase diam. Oleh karena itu, kita dapat melepaskannya menggunakan pelarut yang dielusi dan membuatnya mengelupas untuk memisahkannya juga.

Gambar 01: Kolom Kromatografi

Kromatografi afinitas berguna dalam pemurnian dan pemekatan suatu zat dari campuran menggunakan larutan buffer. Selain itu, sangat membantu dalam mengurangi zat yang tidak diinginkan dalam campuran. Saat mempertimbangkan peralatan yang kami gunakan untuk proses ini, kami harus menggunakan kolom yang diisi dengan fase diam kami. Kemudian, kita harus memuat fase gerak yang berisi biomolekul yang akan kita pisahkan. Selanjutnya, biarkan mereka mengikat dengan fase diam. Setelah itu, menggunakan penyangga pencuci, kita dapat memisahkan biomolekul non-target, tetapi molekul target harus memiliki afinitas yang tinggi untuk fase diam untuk mensukseskan proses pemisahan.

Apa itu Kromatografi Pertukaran Ion?

Kromatografi ion adalah bentuk kromatografi cair di mana kita dapat menganalisis zat ionik. Seringkali, kami menggunakannya untuk menganalisis anionik dan kation (mis. Klorida dan anion nitrat dan kalium, kation natrium). Meskipun kurang umum, kita dapat menganalisis ion organik juga. Selain itu, kita dapat menggunakan teknik ini untuk pemurnian protein karena protein bermuatan molekul pada nilai pH tertentu. Di sini, kami menggunakan fase diam yang solid yang dapat dilekatkan oleh partikel bermuatan. Sebagai contoh, kita dapat menggunakan kopolimer resin polystyrene-divinylbenzene sebagai pendukung padat.

Gambar 02: Fase Kromatografi Pertukaran Ion

Untuk menjelaskan ini lebih lanjut, fase diam memiliki ion tetap seperti anion sulfat atau kation amina kuaterner. Masing-masing harus dikaitkan dengan counterion (ion dengan muatan berlawanan), jika kita ingin menjaga netralitas sistem ini. Di sini, jika penghitungnya adalah kation, maka kita namakan sistem tersebut sebagai resin penukar kation. Tetapi, jika counterion adalah anion, sistemnya adalah resin penukar anion.

Ada lima fase utama dalam proses pertukaran ion;

1. Tahap awal
2. Adsorpsi target
3. Mulai dari elusi
4. Akhir dari elusi
5. Regenerasi

Apa Perbedaan Antara Afinitas dan Pertukaran Ion Kromatografi?

Kromatografi afinitas adalah teknik biokimia yang kami gunakan untuk memisahkan komponen dalam suatu campuran tergantung pada interaksi antara komponen-komponen ini sedangkan kromatografi ion adalah bentuk kromatografi cair di mana kita dapat menganalisis zat ionik. Oleh karena itu, perbedaan utama antara afinitas dan kromatografi penukar ion adalah bahwa kita dapat menggunakan kromatografi penukar ion hanya untuk pemisahan zat ionik sementara kromatografi afinitas mampu memisahkan partikel bermuatan dan tidak bermuatan. Ketika mempertimbangkan prinsip kerja, perbedaan antara afinitas dan pertukaran ion kromatografi adalah bahwa kromatografi afinitas berlangsung karena fakta bahwa molekul target memiliki afinitas tinggi untuk fase diam. Namun, untuk kromatografi penukar ion, molekul target memiliki muatan berlawanan dengan permukaan fase diam.

Infografis di bawah ini menyajikan perbedaan antara afinitas dan kromatografi penukar ion sebagai perbandingan berdampingan.

Ringkasan - Kromatografi Pertukaran Afinitas vs Ion

Singkatnya, kromatografi afinitas dan pertukaran ion adalah dua bentuk teknik kromatografi cair. Perbedaan utama antara afinitas dan penukar ion kromatografi adalah bahwa kita dapat menggunakan afinitas kromatografi untuk memisahkan komponen bermuatan atau tidak terisi dalam campuran sedangkan kita dapat menggunakan kromatografi penukar ion untuk memisahkan komponen bermuatan dalam campuran.

Referensi:

1. "Kromatografi Afinitas." Wikipedia, Wikimedia Foundation, 5 Oktober 2018. Tersedia di sini 
2. Libretexts. "Kromatografi Pertukaran Ion." Chemistry LibreTexts, Libretexts, 29 Desember 2016. Tersedia di sini  

Gambar milik:

1. "Nikel resin" Oleh Pdcook - Pekerjaan sendiri, (CC BY-SA 3.0) melalui Commons Wikimedia 
2. "Iex" Oleh Daliak (Domain Publik) via Commons Wikimedia